應(yīng)用加壓毛細(xì)管電色譜技術(shù)檢測(cè)雞蛋中農(nóng)獸藥殘留的研究.pdf

1、目前，全球食品安全形勢(shì)不容樂(lè)觀，在我國(guó)由于農(nóng)藥、獸藥、食品添加劑、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑等農(nóng)用化學(xué)品的大量或不合理使用，導(dǎo)致了一些毒性作用廣泛、對(duì)健康危害大的食源性化學(xué)殘留污染，尤其是以獸藥和農(nóng)藥殘留污染較為嚴(yán)重。因此，加強(qiáng)農(nóng)藥殘留監(jiān)測(cè)和環(huán)境毒理研究，對(duì)于合理開(kāi)發(fā)和正確使用農(nóng)藥，保護(hù)人類(lèi)健康和生態(tài)環(huán)境，將具有重要的理論和現(xiàn)實(shí)意義。在本研究中，以加壓毛細(xì)管電色譜技術(shù)為檢測(cè)平臺(tái)，通過(guò)使用不同的生物樣品前處理方式、不同類(lèi)型的色譜固定相（C18柱、整體柱）

2、以及不同檢測(cè)器（UV、LIF）建立了加壓毛細(xì)管電色譜對(duì)氨基甲酸酯類(lèi)、四環(huán)素、磺胺、雌激素等四類(lèi)農(nóng)獸藥的新型檢測(cè)方法。
　　論文的主要內(nèi)容包括五部分：
　　第一章，綜述了我國(guó)目前農(nóng)藥使用以及殘留情況。通過(guò)介紹目前我國(guó)農(nóng)藥使用情況、農(nóng)藥殘留情況，說(shuō)明了我國(guó)農(nóng)藥殘留檢測(cè)的重要性和必要性。同時(shí)介紹了目前農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)的主要技術(shù)，比較了這些檢測(cè)技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)。并詳細(xì)介紹了毛細(xì)管電色譜（Capillary electrochromatog

3、raphy, CEC）和加壓毛細(xì)管電色譜(Pressurized capillary electrochromatography, pCEC)技術(shù)的原理、特點(diǎn)和在農(nóng)藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用前景等。
　　第二章，建立了加壓毛細(xì)管電色譜法（pCEC）測(cè)定雞蛋中四種氨基甲酸酯類(lèi)藥品殘留的方法。通過(guò)優(yōu)化流動(dòng)相中有機(jī)相的比例、鹽濃度和外加電壓，在最佳試驗(yàn)條件下，4種氨基甲酸酯藥品在15 min內(nèi)全部基線(xiàn)分離。經(jīng)方法學(xué)考察，4種氨基甲酸酯藥品遞滅威

4、4～20μg/mL、速滅威2.5～20μg/mL、呋喃丹2.5～20μg/mL、西維因1～20μg/mL濃度范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好(R2>0.990)，檢出限分為遞滅威4μg/mL、速滅威2.5μg/mL、呋喃丹2.5μg/mL、西維因1μg/mL，回收率為86.95-104.20％，回收率相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為1.62-9.91%。本研究建立的方法簡(jiǎn)單方便，回收率較高，具有良好的重現(xiàn)性和穩(wěn)定性，能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)多種氨基甲酸酯類(lèi)藥品的同時(shí)分離檢

5、測(cè)。
　　第三章，首次使用加壓毛細(xì)管電色譜技術(shù)(pCEC)建立了雞蛋樣品中四環(huán)素類(lèi)農(nóng)藥多殘留同時(shí)檢測(cè)的分析方法。對(duì)樣品前處理和色譜分析條件進(jìn)行了優(yōu)化，以甲醇-乙腈-20 mmol/L草酸溶液（pH=2.5）（10：20：70，v/v/v）為流動(dòng)相，等度洗脫，通過(guò)加壓毛細(xì)管電色譜法進(jìn)行快速檢測(cè)。經(jīng)方法學(xué)考察，4種四環(huán)素類(lèi)藥品土霉素、4-差向金霉素、鹽酸金霉素、強(qiáng)力霉素在各自標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)濃度范圍內(nèi)線(xiàn)性良好，R2均在0.993以上，回收率為

6、80.46%-100.49%，回收率相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為1.24%-13.81%。通過(guò)等度洗脫25 min內(nèi)可以同時(shí)測(cè)定雞蛋中4種四環(huán)素類(lèi)農(nóng)藥的殘留，較國(guó)標(biāo)中所使用HPLC法梯度洗脫檢測(cè)，對(duì)儀器的要求較低，適合廣大實(shí)驗(yàn)室推廣使用。且生物樣品的前處理方法簡(jiǎn)單方便，回收率高，準(zhǔn)確可靠。
　　第四章，應(yīng)用新型親水性CEC整體柱，建立了加壓毛細(xì)管電色譜（pCEC）技術(shù)測(cè)定雞蛋中四種磺胺藥品殘留的新方法。以二氯甲烷提取樣品，流動(dòng)相為乙腈

7、-30 mmol/L甲酸銨緩沖溶液（pH=4.5）（35：65，v/v），電壓為-10 kV時(shí)，4種磺胺類(lèi)藥品在15 min內(nèi)全部得到基線(xiàn)分離。且在各自合適的濃度范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好（R2>0.990)。同時(shí)在本研究發(fā)現(xiàn)該親水性強(qiáng)陽(yáng)離子交換整體柱在流動(dòng)相中乙腈含量低于50%時(shí)，可顯示反相色譜分離機(jī)理，但柱效、分離度均比常規(guī)反相柱具有明顯優(yōu)勢(shì)。本研究拓展了新型親水性CEC整體柱的使用領(lǐng)域，為磺胺類(lèi)農(nóng)藥殘留提供了新的方法平臺(tái)。
　　第五

8、章，建立了加壓毛細(xì)管電色譜（pCEC）技術(shù)測(cè)定雞蛋中三種雌激素類(lèi)藥物殘留的方法。生物樣品通過(guò)固相萃取后，回收率較高，3種雌激素類(lèi)藥品在25 min內(nèi)全部得到基線(xiàn)分離。且在各自合適的濃度范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好（R2>0.990)。
　　第六章，建立了加壓毛細(xì)管電色譜（pCEC）技術(shù)聯(lián)用激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器（LIF）測(cè)定雞蛋中四種磺胺藥品殘留的新方法。利用磺胺類(lèi)藥物結(jié)構(gòu)中的芳伯胺基與熒光素異硫氰酸素（Flourescein iso-thio