從粘質(zhì)沙雷氏菌體中高效分離制備靈菌紅素的研究.pdf

1、本課題的研究目的是得到高純度的靈菌紅素產(chǎn)物。圍繞這一目的，實驗由三個方面展開：第一，分離純化出一種可以代謝靈菌紅素的菌株，鑒定其為粘質(zhì)沙雷氏菌；第二，優(yōu)化該菌株產(chǎn)靈菌紅素的培養(yǎng)基和發(fā)酵條件，提高靈菌紅素的產(chǎn)量；第三，從發(fā)酵液中提取并純化代謝產(chǎn)物紅色素，分析其純度并鑒定其為靈菌紅素。
　　（1）從湖北省黃石市興華生化有限公司糖化車間采集的酸性土壤中篩選出一株產(chǎn)紅色素的菌株，觀察該菌株的形態(tài)和菌落特征，并對其生理生化特性進行系統(tǒng)研究。

2、由中國典型培養(yǎng)物保藏中心（武漢大學(xué)）鑒定此菌株為粘質(zhì)沙雷氏菌，并將其命名為Serratia marcescensZSG，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心（CCTCC NO: M209195）。
　?。?）為提高靈菌紅素的產(chǎn)量，以靈菌紅素在534nm處的特征吸收峰（A534）、粘質(zhì)沙雷氏菌菌體干重作為分析的指標(biāo)，探究了粘質(zhì)沙雷氏菌發(fā)酵的培養(yǎng)基組成以及發(fā)酵條件的影響。選取蔗糖含量、蛋白胨含量、無機鹽MgCl2含量三個因素設(shè)計單因素實驗，最

3、終確定粘質(zhì)沙雷氏菌發(fā)酵產(chǎn)靈菌紅素的最佳培養(yǎng)基組成為蔗糖1.0％，蛋白胨1.5％，MgCl20.25％。優(yōu)化前測定靈菌紅素 A534為0.120，產(chǎn)量為10.44mg/L，優(yōu)化后A534為1.007，產(chǎn)量為96.52mg/L。
　　（3）靈菌紅素的初步提?。簭陌l(fā)酵液中萃取靈菌紅素，測定A534為0.030；將菌體溶于pH值為3.0的酸性甲醇，用超聲波破壁方法處理溶液，測定上清液A534為0.989。細胞內(nèi)靈菌紅素的含量遠高于發(fā)酵液中