耐高滲酵母產(chǎn)d-阿拉伯醇的研究.pdf

1、D-阿拉伯醇，又稱D-樹(shù)膠糖醇，主要存在于地衣類和蘑菇類中，是一種天然存在的新型功能性五碳醇，是美國(guó)能源部推薦的12種高附加值生物基化合物之一，廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥以及工業(yè)領(lǐng)域。D-阿拉伯醇作為一種高附加值化合物受到了越來(lái)越廣泛的關(guān)注，發(fā)酵法制備D-阿拉伯醇作為一種環(huán)境友好、經(jīng)濟(jì)可行的生產(chǎn)方式受到了越來(lái)越高的重視。
　　本文以實(shí)驗(yàn)室保藏的一株產(chǎn)D-阿拉伯醇耐高滲酵母SFA-S1為出發(fā)菌株，采用紫外線輻照誘變、硫酸二乙酯誘變以及紫外

2、-硫酸二乙酯復(fù)合誘變，通過(guò)初篩和復(fù)篩獲得一株D-阿拉伯醇產(chǎn)量為32.30g/L的突變株UD-3，并對(duì)其發(fā)酵培養(yǎng)基以及發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化。
　　單因素試驗(yàn)結(jié)果表明，影響突變株UD-3D-阿拉伯醇產(chǎn)量顯著的因素有六種，分別為葡萄糖、酵母膏、硫酸銨、硫酸銅、玉米漿、硫酸鋅。為篩選出影響突變株D-阿拉伯醇產(chǎn)量的主要影響因素，并研究各因素間的相互作用，本文采用響應(yīng)面法對(duì)突變株D-阿拉伯醇發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行進(jìn)一步優(yōu)化，Plackett-Burma

3、n實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，酵母膏、硫酸銨、硫酸鋅為影響突變株D-阿拉伯醇產(chǎn)量的主要因素且可信度較高，以Box？-Behnken的設(shè)計(jì)原理，設(shè)計(jì)三因素三水平的響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)，最終獲得該實(shí)驗(yàn)條件下突變株發(fā)酵D-阿拉伯醇的最優(yōu)培養(yǎng)基為:葡萄糖200g/L、玉米漿2.50g/L、酵母膏4.05g/L、硫酸銨3.33g/L、硫酸鋅1.21g/L、硫酸銅0.20g/L，此時(shí)D-阿拉伯醇產(chǎn)量最高為46.67g/L。驗(yàn)證試驗(yàn)表明經(jīng)培養(yǎng)基優(yōu)化后突變株UD-3D-阿拉伯

4、醇產(chǎn)量的平均值為46.62g/L，與預(yù)測(cè)值接近，同優(yōu)化前的32.30g/L相比，產(chǎn)量提高了44.3％。培養(yǎng)條件優(yōu)化結(jié)果表明，在該實(shí)驗(yàn)條件下，突變株產(chǎn)D-阿拉伯醇的最適培養(yǎng)條件為:種齡18h、接種量2％、培養(yǎng)溫度28℃、轉(zhuǎn)速180r/min。
　　為迸一步提高突變株D-阿拉伯醇產(chǎn)量，本文研究了不同添加物對(duì)突變株D-阿拉伯醇產(chǎn)量的影響，結(jié)果表明:在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加氧載體正十二烷，6-磷酸葡萄糖脫氫酶酶活促進(jìn)劑鹽酸吡硫醇，可以改變真菌細(xì)