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文檔簡介
1、研究利用中性蛋白酶水解酪蛋白獲得水解物(HC),經Plastein反應分別在醇相和水相導入外源性氨基酸(Phe、Leu和Pro)獲得的Plastein反應修飾產物分別為HCPHE-E、HCLEU-E、HCPRO-E、HCPHE、HCLEU和HCPRO。Plastein反應修飾產物體外ACE抑制率與HC相比顯著增高,研究表明6種Plastein反應修飾產物的ACE的抑制活性在不同溫度(20-120℃)、酸度(pH2-10)變化時穩(wěn)定,即具
2、有加工工藝穩(wěn)定性。且經體外模擬胃腸道消化實驗后各Plastein反應修飾產物的ACE抑制活性減弱,但仍具有良好的ACE抑制活性。
HC及Plastein反應修飾產物對H2O2誘導人體臍靜脈內皮細胞(HUVEC)氧化損傷模型的保護作用:Plastein反應修飾產可有效降低HUVEC在氧化損傷時的LDH滲出率、MDA生成量,與此同時可使SOD活力、GSH-Rd、CAT的活力顯著增強,而細胞內GSH的含量變化不明顯,說明Plaste
3、in反應修飾產物對H2O2誘導的HUVEC損傷具有良好保護作用,并存在劑量依賴關系。
HC及Plastein修飾產物對SHR大鼠血壓的影響:無創(chuàng)套尾法測定單次口服后的血壓結果表明導入外源性氨基酸為Phe或Pro體內降血壓效果較好,口服后2h時HCPHE(HCPHE-E)和HCPRO(HCPRO-E)組與HC組差異顯著(P<0.05),ΔSBP和ΔDBP最高分別為-23.36±5.57 mmHg和-17.58±3.18 mmHg
4、,且通過對每日灌胃前血壓監(jiān)測發(fā)現,Plastein反應修飾產物對血壓的升高有良好的抑制作用。
HC及Plastein反應修飾產物的體內實驗:1)對體內RAS系統(tǒng)的作用:試驗組血清中ACE、AngⅡ和醛固酮的表達水平低于陰性對照組,降低的最高比例分別為39.56%、39.60%和47.07%。SHR大鼠口服HCPHE,HCPHE-E、HCPRO和HCPRO-E后血清中ACE的水平與HC組相比分別降低28.64%、36.20%、2
5、9.23%和41.59%(P<0.05),ALD的表達水平與口服HC組相比均顯著下降(P<0.05),與體外ACE抑制率的測定結果無相關性。2)對體內抗氧化防御系統(tǒng)的影響:HC組和Plastein反應修飾產物組的SOD的活力變化區(qū)間為85.54±4.25U/mL-88.89±5.32 U/mL,與生理鹽水對照組(80.03±5.21U/mL)差異顯著(P<0.05)。HC組和Plastein反應修飾產物組的CAT活力比生理鹽水組活力增強
6、??诜﨟CPHE和HCPRO的SHR大鼠血清中T-AOC能力為別為10.23±2.10單位/mL血清,10.15±1.65單位/mL血清。較口服HC組升高23.84%和22.88%。
綜上,本試驗中所得經中性蛋白酶水解所得到的酪蛋白水解物經Plastein反應后,所得到的Plastein反應修飾產物具有良好的體外穩(wěn)定性及抗氧化能力。導入Phe和Pro的Plastein反應修飾產物體內降血壓活性強于HC,并在體內有良好的抗氧化活
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