西南委陵菜中黃酮的成分分析與性質(zhì)研究.pdf

1、西南委陵菜(Potentilla fulgens)為多年生草本植物。性味:苦、澀,寒。療效:清熱解毒,澀腸止瀉,涼血止血。生海拔1100~3600m的山坡、草地、灌叢、林緣及林中。迄今為止西南委陵菜尚未被中國(guó)藥典(2010年)作為一種中藥材所收錄,亦少見(jiàn)國(guó)內(nèi)外對(duì)其黃酮類(lèi)化合物的提取、純化、化學(xué)成分以及生物活性的研究報(bào)道,因而具有較高研究?jī)r(jià)值。
　　本文包括利用微波輔助法提取西南委陵菜黃酮、利用大孔吸附樹(shù)脂對(duì)西南委陵菜黃酮純化、利用

2、高效液相色譜電噴霧離子化串聯(lián)二級(jí)質(zhì)譜(HPLC-ESI-MS/MS)對(duì)西南委陵菜黃酮成分進(jìn)行定性定量分析、利用五種化學(xué)方法和細(xì)胞模型法測(cè)定了西南委陵菜黃酮類(lèi)化合物的抗氧化性四個(gè)部分。
　　利用微波法以乙醇作為提取劑提取了西南委陵菜黃酮,考察了乙醇濃度、料液比、提取溫度、微波功率和提取時(shí)間對(duì)西南委陵菜黃酮提取得率的影響。結(jié)果表明,微波法提取西南委陵菜黃酮的最佳條件是乙醇濃度50％、料液比1:30、提取溫度60℃、微波功率400W、提

3、取時(shí)間5min。黃酮的最佳得率為5.68%。
　　通過(guò)研究七種大孔吸附樹(shù)脂的吸附和解吸實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)大孔吸附樹(shù)脂D101對(duì)西南委陵菜黃酮的純化效果最佳。采用動(dòng)態(tài)法對(duì)樣品液的吸附流速和 pH值、解吸劑 pH值和乙醇濃度進(jìn)行了研究。采用高效液相色譜法表征了分離純化效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,大孔吸附樹(shù)脂 D101對(duì)西南委陵菜總黃酮的最佳吸附解吸條件為:樣品液吸附流速2BV/h、樣品液pH4、解吸劑pH8、解吸劑乙醇濃度60%,使純度由28.2%提

4、高到46.6%。
　　利用高效液相色譜電噴霧離子化串聯(lián)二級(jí)質(zhì)譜(HPLC-ESI-MS/MS),根據(jù)保留時(shí)間、分子離子、二級(jí)質(zhì)譜碎片,對(duì)西南委陵菜黃酮成分進(jìn)行定性分析,通過(guò)多反應(yīng)監(jiān)控模式(MRM)監(jiān)控特定碎片離子進(jìn)行了定量分析。西南委陵菜黃酮的主要成分是:芹黃素-7-O-β-D-葡糖苷酸6.66μg/mg、金絲桃苷2.39μg/mg、紫云英苷2.30μg/mg、野黃芩苷1.95μg/mg、木犀草苷0.44μg/mg、翻白葉苷 A0

5、.39μg/mg和異牡荊素0.01μg/mg。
　　考察了西南委陵菜黃酮的總抗氧化活性、清除羥自由基能力、清除超氧陰離子自由基能力、清除DPPH自由基能力和對(duì)卵黃脂蛋白過(guò)氧化的抑制作用,并以抗氧化劑抗壞血酸為對(duì)照。結(jié)果表明西南委陵菜黃酮是一種優(yōu)良的天然抗氧化劑,特別是西南委陵菜黃酮清除羥自由基抑制能力約為抗壞血酸的6倍,對(duì)卵黃脂蛋白過(guò)氧化的抑制作用為抗壞血酸的近3倍。此外,西南委陵菜黃酮在結(jié)腸癌細(xì)胞(HT-29)和小鼠巨噬細(xì)胞(R