東海烏參蛋白肽的酶法制取及精制研究.pdf

1、東海烏參（學(xué)名:白肛海地瓜Acaudina leucoprocta），營(yíng)養(yǎng)價(jià)值與藥用價(jià)值與北方刺參類似，蛋白質(zhì)含量高，氨基酸種類豐富，脂肪含量低，是一種優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)資源，但致密堅(jiān)硬的體表污垢層使得東海烏參中鉛、砷等有害重金屬嚴(yán)重超標(biāo)，腥味重，難去除，阻礙了東海烏參的深度開發(fā)利用。針對(duì)此難題，本課題組進(jìn)行了下列研究:利用外源酶和有機(jī)酸結(jié)合除去重金屬的東海烏參，通過表層微生物發(fā)酵法進(jìn)行整體脫腥，進(jìn)一步利用自溶與蛋白酶解技術(shù)獲得高得率的東海烏參

2、蛋白肽，并進(jìn)行了東海烏參蛋白肽精制研究。
　　表層微生物發(fā)酵法脫腥的結(jié)果顯示:添加不同濃度的安琪酵母和面包酵母進(jìn)行24h培養(yǎng)后，東海烏參的腥味物質(zhì)均有不同程度的減少，其中，對(duì)腥味貢獻(xiàn)較大的飽和醛的含量均減少了50％以上，壬醛和庚醛在添加107面包酵母的東海烏參中均未檢出，說明脫腥效果良好。
　　經(jīng)單因素和多因素試驗(yàn)，得到的東海烏參蛋白肽酶解制備的優(yōu)化工藝為:在pH=10、溫度50℃條件下自溶3h，再加復(fù)合蛋白酶0.4％（以新

3、鮮東海鳥參干物質(zhì)計(jì)），在酶解溫度60℃，底物濃度6％，進(jìn)行90mm酶解。在此優(yōu)化條件下，多肽得率為52.63％，產(chǎn)物中多肽含量（以干物質(zhì)計(jì)）為0.6168g/lg干物質(zhì);經(jīng)測(cè)定，酶解制得的東海鳥參蛋白肽的分子量集中在200-1000Da，為低聚肽，具有較好的吸收性;在烏參蛋白肽粉末中還含有2.87％的多糖及0.026％的皂苷;該制品羥基自由基清除率、超氧自由基清除率、ACE抑制活性的IC50（半數(shù)清除率或半抑制濃度）依次分別為10.99

4、4mg/mL、23.085mg/mL和0.423mg/mL;在pH=7時(shí)，烏參蛋白肽溶解性最高，為99％，沸水浴30min對(duì)其溶解性影響不大。
　　選用脫腥效果較好的D113型陽離子交換樹脂進(jìn)行了脫腥研究，得到的優(yōu)化工藝為:pH=7，樹脂添加量為6％，接觸時(shí)間為1.5h，接觸溫度為35℃。優(yōu)化工藝條件下，東海烏參的酶解液中壬醛、己醛、庚醛含量依次從1.18％降低到0.62％，10.5％降低到5.12％，0.79％降低到0.47％;