多酸型酪氨酸酶抑制劑的功能性研究.pdf

1、酪氨酸酶（EC1.14.18.1）是一種多功能性金屬氧化酶，也是黑色素形成的限速酶。酪氨酸酶催化氧化酚類物質(zhì)生成黑色素，導(dǎo)致果蔬的褐變，人體的色素沉著性皮膚病，此外又對昆蟲起到了保護(hù)作用。因此，開發(fā)低毒高效的新型酪氨酸酶抑制劑在醫(yī)學(xué)、農(nóng)學(xué)、食品化學(xué)等領(lǐng)域有非常重要的意義。
　　多金屬氧酸鹽（POMs）因其豐富多樣的結(jié)構(gòu)、功能特性和廣闊的應(yīng)用領(lǐng)域而備受關(guān)注。研究發(fā)現(xiàn)，POMs很可能成為一種潛在有效的酶抑制劑。因此，本論文研究了兩類K

2、eggin型磷鉬酸鹽對蘑菇酪氨酸酶的抑制作用和機(jī)理，并研究了其中一類化合物的抑菌活性，篩選性能良好的效應(yīng)物，探討了其對黑色素瘤細(xì)胞的部分生物學(xué)效應(yīng)以及對果蔬褐變的影響。本文將為新穎有效的酪氨酸酶抑制劑和果蔬保鮮劑的研制提供實驗依據(jù)，從而也擴(kuò)展了多金屬氧酸鹽的應(yīng)用領(lǐng)域。本論文的主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下：
　?。?）合成了兩類Keggin型的磷鉬酸鹽Na9-nPMo11MnO40（Mn=CuⅡ，ZnⅡ，VⅤ，F(xiàn)eⅢ）和[HGly]9-n

3、PMo11MnO40（Mn=CuⅡ，ZnⅡ，VⅤ，F(xiàn)eⅢ），并通過聚丙烯酰胺凝膠電泳和分光光度法研究其對蘑菇酪氨酸酶二酚酶活力的抑制效果。結(jié)果表明，這兩類效應(yīng)物對酪氨酸酶均有明顯的抑制效果，其中甘氨酸基的過渡金屬取代的磷鉬酸鹽對酶的抑制效果均優(yōu)于對應(yīng)的過渡金屬取代的磷鉬酸鹽，且都表現(xiàn)為不可逆抑制。而過渡金屬取代的磷鉬酸鹽均為酪氨酸酶的可逆抑制劑，并表現(xiàn)出了不同的抑制類型。
　?。?）研究了4種過渡金屬取代的磷鉬酸鹽（PMo11Cu

4、，PMo11Zn，PMo11V，PMo11Fe）對藤黃八疊球菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌和大腸桿菌的抑菌活性。結(jié)果表明，4種化合物對上述細(xì)菌均顯示出較好的抑制作用，且對球菌的抑制效果優(yōu)于對桿菌的抑制效果。此外，相較于其它3種化合物，PMo11V對所有受試菌表現(xiàn)出了最好的抑菌活性。
　?。?）以小鼠黑色素瘤B16細(xì)胞為研究對象，研究了PMo11Cu和PMo11Fe對B16細(xì)胞的形態(tài)、細(xì)胞存活率、細(xì)胞中酪氨酸酶活性以及黑色素含量的

5、影響。實驗結(jié)果表明，當(dāng)PMo11Cu和PMo11Fe達(dá)到一定濃度時，B16細(xì)胞的形態(tài)和增殖率受到明顯影響。此外，效應(yīng)物也能抑制B16細(xì)胞中酪氨酸酶活性，且對黑色素合成量起到了一定的調(diào)控作用。
　?。?）研究了PMo11Fe對鮮切蓮藕片酶促褐變中關(guān)鍵酶及相關(guān)生理生化指標(biāo)的影響。研究結(jié)果表明，PMo11Fe可以顯著地減緩蓮藕切片的褐變度，抑制PPO的活性，增強(qiáng)POD和SOD的活性，并保持高水平的谷胱甘肽、抗壞血酸和蔗糖含量。說明PMo