新型稠雜環(huán)非核苷類HBV抑制劑的設(shè)計(jì)、合成及活性評(píng)價(jià).pdf

1、乙型肝炎(Hepatitis B)是一種由傳染性乙肝病毒(Hepatitis Bvirus，HBV)感染人類肝細(xì)胞導(dǎo)致肝免疫損傷的疾病。目前臨床上應(yīng)用的干擾素類和核苷（酸）類抗HBV藥物雖然在治療HBV感染取得了較大的進(jìn)展，但是由于干擾素類嚴(yán)重的不良反應(yīng)及核苷（酸）類藥物不斷出現(xiàn)的耐藥性病毒株和停藥反彈等問題限制了其應(yīng)用。小分子非核苷類化合物因其種類繁多、結(jié)構(gòu)多樣以及不同于核苷（酸）類藥物的作用機(jī)制，是近年來抗HBV藥物研究的熱點(diǎn)。然而

2、，部分候選藥物因其較高的毒性或較差的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)使得該類抑制劑并未能批準(zhǔn)上市。因此，研發(fā)新型高效低毒、抗耐藥以及具有良好藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)的非核苷類抑制劑具有重要意義。
　　在藥物研發(fā)中，苯并咪唑環(huán)是一類重要的芳雜環(huán)，其衍生物具有廣泛的生物活性以及臨床應(yīng)用。本論文基于苯并咪唑類似物良好的抗HBV活性，利用生物電子等排原理，在苯環(huán)上引入N原子，設(shè)計(jì)了一系列吡啶并咪唑類目標(biāo)化合物。該系列類似物保留了先導(dǎo)化合物活性優(yōu)勢(shì)基團(tuán)，以確保目標(biāo)化合

3、物抗病毒活性;同時(shí)在母環(huán)與右側(cè)環(huán)之間引入長(zhǎng)度和結(jié)構(gòu)不同的烷基linker，以探討其對(duì)化合物抗HBV活性影響。
　　與此同時(shí)，為了深入探討該類抑制劑抗HBV構(gòu)效關(guān)系，我們采用生物電子等排體嘌呤環(huán)取代苯并咪唑環(huán)，設(shè)計(jì)了第二系列嘌呤類非核苷抑制劑，期待發(fā)現(xiàn)具有新穎結(jié)構(gòu)的HBV抑制劑。
　　通過對(duì)上述設(shè)計(jì)的兩個(gè)系列化合物實(shí)施定向合成，共得到了35個(gè)新型的目標(biāo)化合物，包括15個(gè)吡啶并咪唑類化合物和20個(gè)嘌呤類化合物。目標(biāo)化合物結(jié)構(gòu)經(jīng)過

4、1HNMR、13C NMR和MS確證。
　　對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行了體外抗HBV活性評(píng)價(jià)，通過ELISA法測(cè)定了目標(biāo)化合物抑制兩種抗原(HBsAg和HBeAg)分泌活性，PCR法測(cè)定了抑制HBV DNA復(fù)制活性，同時(shí)運(yùn)用CCK-8法測(cè)定了目標(biāo)化合物的細(xì)胞毒性。
　　活性結(jié)果表明，第一系列吡啶并咪唑類似物幾乎不具有抑制抗原(HBsAg和HBeAg)分泌活性，但表現(xiàn)出了良好的HBV DNA抑制活性以及較低的細(xì)胞毒性。其中，無linke

5、r化合物的活性明顯低于有l(wèi)inker的化合物;當(dāng)R2為N-甲基吡咯基和丁二酰亞胺基時(shí)有助于提高化合物活性。值得注意的是，化合物6f(IC50=5.06μM，SI＞19.76)和6g(IC50=2.43μM，SI＞41.15)的活性水平接近陽性藥物拉米夫定(IC50=1.15μM，SI＞86.96)，可以作為苗頭化合物進(jìn)行深入研究。
　　第二系列新型嘌呤類化合物幾乎不具有HBV DNA抑制活性，但部分化合物表現(xiàn)出一定的抑制抗原(HB

6、sAg和HBeAg)分泌活性。與第一系列一致，含linker的化合物活性明顯高于不含linker的化合物，當(dāng)含硫linker被氧化為亞砜基時(shí)，化合物的活性明顯提高。其中化合物L(fēng)N-S-10活性最好，對(duì)HBsAg的活性結(jié)果為IC50=6.63μM，SI=1.17;對(duì)HBeAg的活性結(jié)果為IC50=4.43μM，SI=1.72。提示該系列化合物可能具有不同吡啶并咪唑類衍生物的抗病毒作用機(jī)制。
　　綜上所述，本論文基于當(dāng)前抗HBV藥物研