河蜆多肽抗氧化活性及對急性化學(xué)性肝損傷的保護作用.pdf

1、河蜆是一種高產(chǎn)的經(jīng)濟貝類，其味道鮮美、營養(yǎng)豐富，具有很大的開發(fā)利用潛力。目前國內(nèi)外學(xué)者對河蜆的研究主要集中于河蜆多糖和河蜆糖蛋白，對河蜆生物活性多肽的研究很少。本文重點對河蜆多肽提取、分離純化及抗氧化活性進行研究。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　1.酶法制備河蜆多肽的工藝優(yōu)化
　　以河蜆為原料，DPPH清除率為響應(yīng)值，通過對比發(fā)現(xiàn)胰蛋白酶的酶解效果最好。以胰蛋白酶為酶制劑進行酶解試驗，在單因素試驗的前提下通過響應(yīng)曲面試驗優(yōu)化工

2、藝參數(shù)。優(yōu)化后的工藝參數(shù)為:當(dāng)加酶量1600U/g，pH值8.0，酶解溫度38.8℃，酶解時間6.5h。在此條件下，DPPH清除率達到最大值，為43.25±0.17％。
　　2.超濾分離河蜆多肽抗氧化活性及穩(wěn)定性研究
　　對制備的河蜆多肽進行超濾分離，比較發(fā)現(xiàn)低分子量(＜3KD)的河蜆多肽具有較強的抗氧化活性。對低分子量河蜆多肽的活性穩(wěn)定性研究發(fā)現(xiàn):①溫度對低分子量河蜆多肽活性影響較小;②反復(fù)凍融對低分子量河蜆多肽活性影響較

3、小;③堿性條件對多肽生物活性的影響較大;④低分子量河蜆多肽活性受重金屬離子(Cu2+、Zn2+)影響較大，重金屬離子不利于低分子量河蜆多肽活性保持。
　　3.低分子量河蜆多肽分離純化
　　低分子量河蜆多肽經(jīng)Sephadex G-15柱洗脫共得到6個峰。試驗發(fā)現(xiàn)峰4(CFPs-4)的各項IC50值均最小，其活性最強，對應(yīng)的DPPH清除率為0.45mg/mL，羥自由基清除率為0.25mg/mL。繼續(xù)使用DA201-C型大孔樹脂進

4、行分離純化，從低分子量河蜆多肽分離組峰4(CFPs-4)中分離出的3個峰，最終發(fā)現(xiàn)峰3的抗氧化活性最強，對應(yīng)的DPPH清除率為0.36mg/mL，羥自由基清除率為0.23mg/mL。
　　4.低分子量河蜆多肽對急性化學(xué)性肝損傷的保護效果
　　將低分子量河蜆多肽應(yīng)用到CCL4構(gòu)建的化學(xué)性肝損傷小鼠模型中。攝入活性多肽對小鼠的體重幾乎無影響，適量的活性多肽攝入能夠明顯降低小鼠的肝體比，提高小鼠的脾體比。高劑量的低分子量河蜆多肽對