同時(shí)攜帶多種耐藥基因?qū)е路饎诘罔鄞釛U菌產(chǎn)生多重耐藥.pdf

1、目的：為了研究1株弗勞地枸櫞酸桿菌同時(shí)攜帶多種耐藥基因?qū)е碌亩嘀啬退幀F(xiàn)象，以及所攜帶的耐藥基因類型和分子生物學(xué)特征，探討其可能的耐藥機(jī)制。
　　 方法：收集一株分離自一位23歲急性淋巴細(xì)胞白血病男性住院患者痰標(biāo)本中的弗勞地枸櫞酸桿菌NC118。采用Kerby-Bauer紙片擴(kuò)散法測(cè)定其藥物敏感性，Etest法測(cè)定抗菌藥物的最低抑菌濃度(MICs);應(yīng)用PCR法檢測(cè)β內(nèi)酰胺酶基因，質(zhì)粒傳染的喹諾酮耐藥決定因素qnr，16SrRNA

2、甲基化酶基因等，并對(duì)PCR陽(yáng)性產(chǎn)物進(jìn)行DNA序列分析；采用接合試驗(yàn)測(cè)定耐藥基因是否具有轉(zhuǎn)移性；使用QIAGEN質(zhì)粒抽取試劑盒來(lái)提取弗勞地枸櫞酸桿菌NC118的質(zhì)粒，并對(duì)提取的質(zhì)粒DNA進(jìn)行電泳。
　　 結(jié)果：弗勞地枸櫞酸桿菌NC118除了對(duì)四環(huán)素敏感外，對(duì)其他臨床常用抗生素全部耐藥：該菌株同時(shí)存在11種抗生素耐藥基因，包括KPC-2，aac(6')-Ib-Ir，qnrA1，qnrB1,blaTEM-1,blaCTX-M-3,bl

3、aCTX-M-14,armA,aadA2,dfrA12和blaCMY-49;經(jīng)過(guò)反復(fù)接合試驗(yàn)，弗勞地枸櫞酸桿菌NC118只能將攜帶的ESBLs耐藥質(zhì)粒成功地傳遞給受體菌E.coliJ53，但未獲得含其他耐藥質(zhì)粒的接合子。抽取的質(zhì)粒進(jìn)行電泳顯示，弗勞地枸櫞酸桿菌NC118含有4個(gè)質(zhì)粒，大小分別約為50.0kb，7.0kb，4.0kb和2.0kb。
　　 結(jié)論：弗勞地枸櫞酸桿菌NC118同時(shí)攜帶多種耐藥基因，包括一個(gè)新型AmpC酶基