雙歧桿菌調(diào)節(jié)Treg-Th17細(xì)胞平衡及其信號(hào)通路緩解對(duì)蝦蛋白致敏反應(yīng)的機(jī)制研究.pdf

1、食物過(guò)敏已成為全球廣泛關(guān)注的食品安全問(wèn)題，其發(fā)生率逐年上升。近年來(lái)，研究學(xué)者希望能借助益生菌來(lái)有效減緩過(guò)敏反應(yīng)，其免疫調(diào)節(jié)作用已逐漸被發(fā)現(xiàn)。但有關(guān)益生菌調(diào)節(jié)Treg/Th17細(xì)胞平衡及其信號(hào)通路緩解對(duì)蝦蛋白致敏反應(yīng)的機(jī)制研究甚少。故本課題以前期獲得的、可有效緩解中國(guó)對(duì)蝦肌肉蛋白過(guò)敏的雙歧桿菌為研究對(duì)象，通過(guò)構(gòu)建中國(guó)對(duì)蝦肌肉蛋白過(guò)敏的Balb/c小鼠治療和預(yù)防模型，探討雙歧桿菌對(duì)Balb/c小鼠對(duì)蝦蛋白過(guò)敏預(yù)防與治療效果的差異，分析過(guò)敏癥

2、狀及血清中特異性IgE、IgG2a、組胺水平、不同時(shí)間點(diǎn)小鼠體重和脾臟臟器系數(shù)變化，并研究了雙歧桿菌調(diào)控過(guò)敏小鼠不同組織Treg/Th17細(xì)胞失衡的現(xiàn)象。此外，基于mTOR信號(hào)通路研究雙歧桿菌緩解對(duì)蝦蛋白過(guò)敏中Treg/Th17細(xì)胞失衡的分子機(jī)制，建立雙歧桿菌和雷帕霉素干預(yù)過(guò)敏小鼠模型。本研究旨在從Treg/Th17細(xì)胞平衡及其信號(hào)通路調(diào)控角度解析雙歧桿菌免疫調(diào)控及緩解致敏反應(yīng)的分子機(jī)制。主要研究結(jié)果如下:
　　(1)體內(nèi)試驗(yàn)表明

3、，不同時(shí)期的雙歧桿菌干預(yù)均對(duì)過(guò)敏小鼠肺組織癥狀有明顯的改善，脾臟臟器系數(shù)和組胺含量顯著降低，雙歧桿菌治療組相對(duì)于預(yù)防組，特異性IgE水平更低。
　　(2)中國(guó)對(duì)蝦肌肉蛋白過(guò)敏小鼠脾臟、腸系膜淋巴結(jié)和結(jié)腸中存在Treg/Th17細(xì)胞失衡現(xiàn)象。雙歧桿菌治療組相對(duì)于預(yù)防組，CD25表達(dá)量更高，與Th17相關(guān)的細(xì)胞因子IL-17A表達(dá)量更低，另外雙歧桿菌治療組Treg/Th17細(xì)胞比例顯著高于預(yù)防組，因此推斷不同時(shí)期的雙歧桿菌干預(yù)均能有效

4、緩解小鼠過(guò)敏癥狀，其中雙歧桿菌的治療效果要優(yōu)于預(yù)防效果。
　　(3)雙歧桿菌和雷帕霉素均能有效促進(jìn)脾淋巴細(xì)胞向Treg型細(xì)胞分化，抑制Th17型細(xì)胞免疫應(yīng)答，導(dǎo)致脾臟中IL-17A、IL-23表達(dá)量明顯下降，轉(zhuǎn)錄因子Foxp3和細(xì)胞因子TGF-β表達(dá)量顯著增加，進(jìn)而有效緩解因Treg/Th17細(xì)胞失衡導(dǎo)致的過(guò)敏反應(yīng)。WesternBlotting分析P-p70S6K、P-4EBP1、P-AKT和P-STAT3蛋白表達(dá)水平，其結(jié)果表