Treg-Th17細(xì)胞平衡失調(diào)與原發(fā)性食道癌臨床分期的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:
　　分析Th17和Treg細(xì)胞在原發(fā)性食道癌(primary esophagus carcinoma，PEC)患者外周血中的比例，探討Th17和Treg細(xì)胞與原發(fā)性食道癌臨床分期的相關(guān)性，為食道癌的早期診斷及以此為靶點(diǎn)的免疫療法的研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:
　　分別收集87例原發(fā)性食道癌患者和39例健康體檢者的外周血標(biāo)本，常規(guī)分離單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Th17和Treg細(xì)胞的比例;實(shí)時(shí)定量P

2、CR(real-time PCR)法檢測(cè)外周血中Th17和Treg細(xì)胞增殖分化相關(guān)因子，IL-1R、IL-6、IL-17、IL-21、IL-22、IL-23、TGF-β、RORc、Foxp3的mRNA表達(dá)水平;應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行多元線性回歸分析，探討Th17和Treg細(xì)胞比例與原發(fā)性食道癌臨床分期及其他臨床指標(biāo)（年齡、性別、腫瘤部位、分化程度、浸潤(rùn)深度、是否出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等）之間的相關(guān)性。
　　結(jié)果:
　　1.流

3、式細(xì)胞術(shù)分析結(jié)果表明，原發(fā)性食道癌患者外周血標(biāo)本中Th17細(xì)胞數(shù)量顯著高于正常對(duì)照組(4.598±0.776％vs3.017±0.613％，P＜0.001)，并與患者的臨床分期(P=0.018)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.026)有關(guān)，而與患者的性別、年齡、腫瘤分化程度、腫瘤大小、浸潤(rùn)深度等無(wú)關(guān)(P＞0.05); Treg細(xì)胞數(shù)量也顯著高于正常對(duì)照組(8.912±1.772％vs4.732±0.884％，P＜0.001)，與患者的臨床分期(P

4、=0.037)、腫瘤分化程度(P=0.029)有關(guān)，與患者的性別、年齡、腫瘤大小、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)(P＞0.05); Treg/Th17比值明顯高于正常對(duì)照組(1.885±0.417 vs1.568±0.338，P＜0.001)，并與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P=0.032)。
　　2.Real-time PCR結(jié)果提示，原發(fā)性食道癌患者Th17和Treg細(xì)胞分化增殖相關(guān)因子，IL-1R、IL-6、IL-17、IL-21、IL-

5、22、IL-23、TGF-β、RORc和Foxp3的mRNA表達(dá)水平均高于健康對(duì)照組，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　3.多元線性回歸分析發(fā)現(xiàn)，原發(fā)性食道癌患者外周血中Th17、Treg細(xì)胞數(shù)量與TNM分期密切相關(guān)(t=3.794，P=0.018;t=2.961，P=0.037)。Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞數(shù)量及Treg/Th17比值，隨TNM分期而增加（Th17細(xì)胞:Ⅰ期3.867±0.649％，Ⅱ期4.016±0

6、.711％，Ⅲ期4.567±0.94％，Ⅳ期5.02±0.897％;Treg細(xì)胞:Ⅰ期6.577±1.283％，Ⅱ期7.934±1.352％，Ⅲ期9.725±1.190％，Ⅳ期9.97±1.274％; Treg/Th17:Ⅰ期1.750±0.275,Ⅱ期1.845±0.306,Ⅲ期1.901±0.293,Ⅳ期1.984±0.435）。將Ⅰ期和Ⅱ期作為腫瘤早期階段，Ⅲ期和Ⅳ期作為腫瘤進(jìn)展期即晚期階段，早晚期Th17和Treg細(xì)胞數(shù)量及Tr

7、eg/Th17比值與正常對(duì)照組相比，均有顯著差異(P＜0.001);早期Th17和Treg細(xì)胞數(shù)量顯著低于晚期(Th17:早期3.996±0.683％ vs晚期4.887±0.793％，P＜0.01;Treg:早期7.395±1.390％ vs晚期9.896±1.276％，P＜0.01)，而Treg/Th17比值在早、晚期之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（早期1.820±0.298，vs晚期1.926±0.356，P＞0.05）。Th17與Treg細(xì)胞

8、隨TNM分期呈正向直線關(guān)系(r=0.5832，P＜0.01)。
　　結(jié)論:
　　1.原發(fā)性食道癌患者外周血中，Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞、Treg/Th17比值及增殖分化相關(guān)因子均較正常對(duì)照組顯著增高。
　　2.Th17和Treg細(xì)胞比例及Treg/Th17比值與原發(fā)性食道癌TNM分期密切相關(guān)，二者隨TNM分期呈顯著正向相關(guān)。
　　3.Th17細(xì)胞和Treg細(xì)胞可促進(jìn)原發(fā)性食道癌的發(fā)生發(fā)展，可作為食道癌的早期診斷