電擊死后大鼠骨骼肌MuRF1表達的法醫(yī)學研究.pdf

1、目的:電擊死和他殺偽裝電擊是法醫(yī)學實踐中常見的案件類型之一，但實際檢案過程中，法醫(yī)工作者對其診斷仍沒有統(tǒng)一的標準，尤其是對無電流斑情況的死因推斷或特殊情況的水中電擊。許多學者從電擊死后各個組織器官的形態(tài)學及分子水平進行了研究。當電擊案件中無電流斑形成時，組織學改變不明顯時，電擊死后根據(jù)骨骼肌的變化推斷早期死亡時間鮮有報告。我們設(shè)計了以下實驗檢測通電肢體骨骼肌MuRF1的表達情況，以期鑒別生前電擊死和死后電擊、生前電擊死和死后電擊早期死亡

2、時間的推斷、電損傷對不同骨骼肌類型的影響。
　　方法:60只健康的Wistar大鼠，分成電擊死組、死后電擊組、空白對照組，每組20只。電擊死組大鼠用220 v交流電的兩極分別連接右前肢與左后肢，通電90 s致死，于電擊死后0h、1h、3h、6h取材;死后電擊組大鼠采用頸椎脫臼法處死后，分別于0h、1h、3h、6h電擊90 s取材;空白對照組大鼠直接頸椎脫臼法處死，不進行電擊，于死后0h、1h、3h、6h取材。取左后肢腓腸肌、脛骨前

3、肌，進行HE染色、免疫組化染色和實時熒光定量PCR處理。
　　結(jié)果:1、HE染色結(jié)果
　　電擊死組:可見骨骼肌細胞呈空泡樣改變、灶狀變性、壞死;部分細胞核極化、部份骨骼肌細胞斷裂、波浪樣改變，部分骨骼肌橫紋不清;胞漿凝聚、均質(zhì)化、嗜酸性變;胞核固縮、深染、扭曲，部分核伸長;骨骼肌間細小血管擴張，紅細胞聚集，血管內(nèi)皮細胞腫脹、核深染。隨著死亡時間的延長，細胞溶解、壞死加重，可見嗜酸性粒細胞聚集。
　　死后電擊組:可見骨骼

4、肌細胞灶狀壞死;骨骼肌細胞溶解、斷裂;骨骼肌細胞濁腫顯著;胞核扭曲、固縮、深染，部分核伸長;骨骼肌細胞內(nèi)肌絲間隙增寬明顯;嗜酸性粒細胞浸潤。
　　空白對照組:可見骨骼肌細胞變性、壞死;胞漿凝聚、均質(zhì)化、嗜酸性;胞核固縮、深染;血管內(nèi)皮細胞腫脹;骨骼肌間細小血管擴張，紅細胞聚集。
　　2、免疫組化染色結(jié)果
　　電擊死組通電肢體即刻腓腸肌胞漿可見棕黃色顆粒聚集，隨著時間的推移棕黃色顆粒逐漸減弱;死后電擊組通電肢體即刻腓腸肌

5、可見胞漿棕黃色顆粒聚集，平均密度比電擊死組低;電擊死組通電肢體即刻脛骨前肌可見胞漿棕黃色顆粒聚集，1h平均密度達峰值，隨后降低;死后電擊組通電肢體即刻脛骨前肌可見胞漿棕黃色顆粒，與電擊死組脛骨前肌的變化趨勢相同，平均密度比電擊死組低;電擊死組、死后電擊組、空白對照組通電肢體脛骨前肌胞漿棕黃色顆粒平均密度大于腓腸肌。
　　3、RT-PCR定量結(jié)果
　　電擊死組大鼠左后肢腓腸肌MuRF1-mRNA表達量于死后即刻升高，1h、3h

6、下降，與空白對照組相比有顯著差異，6h低于空白對照組無顯著意義;電擊死組大鼠左后肢脛骨前肌MuRF1-mRNA表達量于死后即刻升高，1h達峰值，3h開始降低，與空白對照組相比均有顯著差異;死后電擊組左后肢腓腸肌、脛骨前肌較空白對照組高，但升高不如電擊死組明顯;電擊死組、死后電擊組左后肢脛骨前肌MuRF1-mRNA含量均較腓腸肌高。
　　結(jié)論:1、MuRF1可為電擊死后早期死亡時間的推斷提供一定的參考依據(jù)。
　　2、MuRF1