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文檔簡介
1、牛病毒性腹瀉病毒(Bovine Viral Diarrhea Vires)隸屬于黃病毒科(Flaviridae)、瘟病毒屬(Pestivirus)。該病毒可以造成牛只的持續(xù)性感染,并且不表現(xiàn)出顯著的癥狀,也可引發(fā)牛病毒性腹瀉(Bovine viral diarrhea,BVD),臨床表現(xiàn)為白細胞減少、黏膜糜爛潰瘍、腹瀉及懷孕母牛流產(chǎn)或產(chǎn)出畸形胎。該病的流行已經(jīng)給世界養(yǎng)牛業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。
NS3蛋白具有較高的免疫原性
2、,在病毒感染過程中,免疫系統(tǒng)的CD4+T細胞主要識別NS3和E2兩種蛋白,并可誘導免疫細胞產(chǎn)生針對該蛋白的抗體。因此檢測NS3蛋白抗體水平可以作為檢測牛病毒性腹瀉病毒感染的有效指標之一。
本研究利用大腸桿菌表達系統(tǒng)分段表達重組NS3蛋白,利用標準陽性血清篩選NS3蛋白B細胞線性表位區(qū),共篩選出6段具有反應原性的蛋白肽段;(1VCKKITEHERCHVNI15),(20AFFGVMPRGTTPRAPVR36),(46RRGL
3、ETGWAYTHQGGI61),(281EGDMATGITYASYGYFC297),(426YSGEDPANLRWTSQSPYVVVATNAIESGV455)和(481FIVTGLKRMAVTVGEQA497)。篩選出的表位不但可以作為BVDV的檢測抗原建立多種檢測血清學檢測手段,亦為今后開展非結(jié)構蛋白NS3的抗原結(jié)構甚至致病機理的研究提供理論依據(jù)。
同時本研究應用套式RT-PCR方法擴增出牛病毒性腹瀉病毒VEDEVAC株
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