搭載klotho蛋白熱敏型聚合凝膠在內鏡下治療胃潰瘍.pdf

1、目的：
　　1、探索klotho蛋白是否對GECs（胃上皮細胞）增殖率和遷移率有促進作用；
　　2、制作一款包裹 klotho蛋白能用于內鏡下的熱敏型聚合凝膠并對材料進行評估；
　　3、通過動物實驗驗證聚合凝膠對胃潰瘍的愈合是否有促進作用。
　　方法：
　　1、細胞增殖實驗（EDU）和細胞遷移實驗（Transell）：將對數期生長的GECs分為klotho蛋白組和對照組，klotho蛋白組添加klotho，

2、觀察兩組細胞增殖率和遷移率有無差異。
　　2、聚合凝膠的制作及評估：以β-環(huán)糊精包裹klotho蛋白的制成納米微球，用殼聚糖、F-127、甘油等材料制作成一種溫度敏感性凝膠，納米微球與凝膠混合均勻后通過掃描電鏡觀察，并測定生物材料中klotho蛋白的緩釋速度。
　　3、胃潴留實驗：將8只C57小鼠分為2組，對照組和實驗組，分別灌入含1％亞甲藍的生理鹽水、klotho蛋白凝膠，在0、30、60、120分鐘后取胃，通過活體熒光成

3、像系統(tǒng)檢測熒光強度。
　　4、動物實驗：將60只SD大鼠隨機分為生理鹽水組，空白凝膠組，奧美拉唑組、klotho蛋白凝膠組4組。各組大鼠成模后每天分別用生理鹽水、空白凝膠、奧美拉唑、Klotho蛋白凝膠灌胃1次治療。在治療的第1、3、7天每組隨機處死5只大鼠取材，測量潰瘍面積及新生毛細血管數量。潰瘍標本切片后行HE染色、PAS染色、PNCA染色，觀察各組組織學變化情況。
　　結果：
　　1、細胞實驗：klotho蛋白組

4、的增值率是對照組的2.3倍，細胞遷移數量是對照組的3.6倍。
　　2、電鏡觀察結果：納米微球直徑在50-200nm之間，可見納米微球勻稱散布在klotho凝膠上面。
　　3、胃潴留實驗：klotho凝膠的熒光的強度在每個時間段都明顯高于對照組。
　　4、動物實驗：klotho凝膠組愈合情況從肉眼觀和組織學角度都要優(yōu)于各個對照組。
　　結論：
　　1、證明了Klotho蛋白在酸性條件下能夠促進GECs的增殖遷