HepG2細(xì)胞中與HBV復(fù)制相關(guān)的微染色體重塑.pdf

1、目的：乙型肝炎病毒(HBV)的復(fù)制中間體共價(jià)閉合環(huán)狀DNA(cccDNA),與組蛋白和非組蛋白結(jié)合構(gòu)成了病毒微染色體,而病毒微染色體重塑,如乙?；冉M蛋白翻譯后修飾對HBV復(fù)制起著重要的調(diào)控作用。我們的研究是為了進(jìn)一步明確在有HBV復(fù)制的HepG2細(xì)胞中,cccDNA結(jié)1合組蛋白H3除發(fā)生了乙?；揎椡?是否還發(fā)生了其他和HBV復(fù)制相關(guān)的微染色體重塑情況。
　　 方法：在成功構(gòu)建HBV細(xì)胞復(fù)制模型的基礎(chǔ)上,我們將染色質(zhì)免疫共沉淀

2、(ChIP)技術(shù)和實(shí)時(shí)定量PCR相結(jié)合,檢測了瞬時(shí)轉(zhuǎn)染線性HBV DNA到HepG2細(xì)胞后不同時(shí)間點(diǎn)的cccDNA結(jié)合乙酰化組蛋白H3,磷酸化組蛋白H3和甲基化組蛋白H3的動(dòng)態(tài)變化情況。
　　 結(jié)果：在有HBV復(fù)制的HepG2細(xì)胞中,cccDNA結(jié)合組蛋白H3不僅發(fā)生了乙?；揎?同時(shí)還發(fā)生了磷酸化和單甲基化修飾。并且,在轉(zhuǎn)染了線性HBV DNA后不同時(shí)間點(diǎn)的cccDNA結(jié)合組蛋白H3的乙?；图谆揎椀膭?dòng)態(tài)變化和HepG2細(xì)