煙粉虱生物型的分子鑒定及P450基因與寄主轉(zhuǎn)換關(guān)系的研究.pdf

1、煙粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)是世界上危害最為嚴(yán)重的入侵性害蟲之一,也是湖北省的主要害蟲,準(zhǔn)確地鑒別煙粉虱入侵生物型和土著生物型具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。mtCOI PCR-RFLP技術(shù)具有簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)、快速的特點(diǎn),是當(dāng)前應(yīng)用最廣泛的煙粉虱生物型快速鑒定技術(shù),但是,不同限制性內(nèi)切酶為基礎(chǔ)的mtCOIPCR-RFLP技術(shù)在鑒定我國(guó)煙粉虱種群中的有效性仍不明確。本論文通過以線粒體細(xì)胞色素氧化酶Ⅰ(mitochondri

2、al cytochrome oxidase I,mtCOI)為基礎(chǔ)的PCR-RFLP和基因測(cè)序的方法,鑒定湖北5個(gè)棉花主產(chǎn)區(qū)煙粉虱地理種群的生物型組成,并分析5個(gè)地理種群與其他省種群的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系。本研究比較了已報(bào)導(dǎo)的5種限制性內(nèi)切酶(AluⅠ、TaqⅠ、Tru9Ⅰ、MseⅠ和VspⅠ)mtCOI PCR-RFLP技術(shù)在鑒別中國(guó)煙粉虱種群入侵生物型和土著生物型(B型、Q型,ZHJ1型、ZHJ2型、ZHJ3型)的有效性。本研究通過寄主轉(zhuǎn)換

3、的方法獲得寄主適應(yīng)性差異,應(yīng)用生物信息學(xué)、半定量。PCR及熒光定量PCR等技術(shù)方法,分析煙粉虱寄主適應(yīng)性改變后細(xì)胞色素P450的基因表達(dá)量的差異性。主要結(jié)果如下:
　　 1.Q型煙粉虱為湖北省棉花主產(chǎn)區(qū)的優(yōu)勢(shì)種群而武漢溫室種群則均為B型煙粉虱,土著生物型ZHJ1型在大田中略有分布；系統(tǒng)發(fā)育分析則表明,湖北省棉花主產(chǎn)區(qū)B型和Q型煙粉虱種群均與中國(guó)其它多個(gè)省的煙粉虱種群親緣關(guān)系較近,有助于預(yù)測(cè)湖北煙粉虱的入侵途徑。
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4、.明確國(guó)外報(bào)道的5種限制性內(nèi)切酶對(duì)中國(guó)煙粉虱生物型的適用性.AluⅠ-mtCOIPCR-RFLP技術(shù)能有效鑒別中國(guó)ZHJ1型、ZHJ3型和95.6％的Q型煙粉虱個(gè)體,卻不能區(qū)分B型和ZHJ2型煙粉虱；應(yīng)用TaqⅠ-mtC0I PCR-RFLP技術(shù)能有效鑒別中國(guó)ZHJ1型、ZHJ2型和B型煙粉虱個(gè)體,不能區(qū)分ZHJ3型和97.0％的Q型煙粉虱個(gè)體；而VspⅠ-mtCOIPCR-RFLP技術(shù)不能鑒別ZHJ1型和98.5％的Q型煙粉虱個(gè)體,也