紫杉醇飽和與不飽和脂肪酸酯脂質體的體內外性質比較.pdf

1、脂肪酸類化合物在哺乳動物體內有較為完整的吸收代謝途徑，研究發(fā)現脂肪酸能作為生物前體物質或能量被細胞攝取，因此廣泛用于前藥的設計之中。文獻報道的脂肪酸修飾的抗腫瘤藥物多以二十二碳六烯酸(DHA)、α-亞麻酸(α-LNA)、共軛亞油酸(LA)為代表的不飽和脂肪酸，但是關于長鏈飽和脂肪酸抗腫瘤前藥的研究較少。本研究以臨床較為常用的抗腫瘤藥物紫杉醇(Paclitaxel，PTX)為模型藥物，選擇兩種長鏈飽和脂肪酸——棕櫚酸(Palmitate

2、acid，PA)和硬脂酸(Stearate acid，SA)，以及兩種不飽和脂肪酸——亞麻酸(Linolenate acid，LNA)和二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid，DHA)作為配體，合成了四種紫杉醇脂肪酸酯前藥，將其制備成脂質體，并對其體內外性質進行研究，以期比較紫杉醇飽和與不飽和脂肪酸酯前藥在抗腫瘤效果方面的差異，并篩選出一種低毒高效的紫杉醇前藥制劑。
　　本研究首先通過酯化法合成了紫杉醇飽和與不飽

3、和脂肪酸酯，即PTX-PA、PTX-SA、PTX-LNA和PTX-DHA，產物經ESI-MS與1H NMR確證為目標化合物。處方前研究表明，各種化合物的脂溶性均有不同程度增加。
　　采用薄膜分散-探頭超聲法制備紫杉醇棕櫚酸酯脂質體(PTX-PA-L)、紫杉醇硬脂酸酯脂質體（PTX-SA-L）、紫杉醇亞麻酸酯脂質體(PTX-LNA-L)和紫杉醇二十二碳六烯酸酯脂質體(PTX-DHA-L)。對其制備工藝和處方成分進行單因素考察優(yōu)化后，

4、最終確定處方工藝如下:磷脂與藥物比例為25∶1，磷脂與膽固醇比例為25∶1，DSPE-PEG2000用量為0.4％，;制備過程中的薄膜制備時間和探頭超聲時間分別為45℃和90s。對最終處方進行驗證后發(fā)現，與PTX-LNA和PTX-DHA相比，PTX-PA和PTX-SA制備出的脂質體粒徑更小，過膜較順暢，包封率較高，在制劑制備中更有優(yōu)勢。
　　體外血漿轉化研究表明，四種前藥脂質體均能在大鼠血漿中緩慢釋放出活性藥物紫杉醇。PTX-PA

5、-L、PTX-SA-L、PTX-LNA-L和PTX-DHA-L在血漿中孵育30h的轉化率分別為3.49％、6.74％、8.55％和10.26％。體外細胞毒性研究結果表明，血漿中較穩(wěn)定，轉化較慢的PTX-PA-L和PTX-SA-L藥物細胞毒性較低，而血漿中活性藥物釋放較快的PTX-LNA-L和PTX-DHA-L毒性相對較高。
　　在體外研究的基礎上，進行了體內藥動學和組織分布實驗?？疾炝俗仙即甲⑸湟骸TX-PA-L、PTX-SA-

6、L、PTX-LNA-L和PTX-DHA-L的體內藥動學特征。實驗結果發(fā)現血漿中累積釋放速度較慢，血漿清除率低的PTX-PA和PTX-SA代謝出的活性母藥PTX平均滯留時間長，代謝出的PTX的藥時曲線下面積和半衰期分別為紫杉醇注射液的2倍和5倍。清除速率較快的PTX-LNA和PTX-DHA代謝出的PTX藥時曲線下面積較小，半衰期短，與紫杉醇注射液相比并不具備優(yōu)勢。組織分布研究表明，腫瘤組織中，PTX-PA-L代謝出的PTX的AUCTumo

7、r(56.08μg/g*h)顯著高于PTX-LNA-L(28.82μg/g*h)。證明PTX-PA-L在腫瘤組織可以更多的轉化為PTX，增加藥物在腫瘤部位的蓄積。
　　最后，采用小鼠S180肉瘤細胞模型，考察了紫杉醇注射液、PTX-PA-L和PTX-LNA-L的體內抗腫瘤效果和骨髓抑制毒性。結果顯示，等摩爾劑量下，雖然兩種前藥脂質體抗腫瘤效果均優(yōu)于紫杉醇注射液，但PTX-PA-L（紫杉醇飽和脂肪酸酯脂質體）的抑瘤作用約為PTX-L