流產布氏桿菌S19株bp26基因標記疫苗株的構建及免疫原性初步研究.pdf

1、布氏桿菌病是一種在世界范圍內廣泛流行并造成嚴重危害的人畜共患病，布氏桿菌是布氏桿菌病的病原體，它是一種胞內寄生的革蘭氏陰性球桿菌，無芽抱，有莢膜，無鞭毛不能運動，不呈兩極染色。布氏桿菌病的特點是，一旦發(fā)病并轉入慢性就無法根治，因此，布氏桿菌病的預防對于控制布氏桿菌病是非常重要的，預防主要通過接我國目前使用比較廣泛的減毒活疫苗株有牛流產布氏桿菌S19 弱毒疫苗，馬耳他布氏桿菌M5 弱毒疫苗，以及豬布魯氏菌S2弱毒疫苗等。在這些疫苗株的使用

2、中還發(fā)現，它們具有交叉免疫保護效果，但是，也發(fā)現了一個比較嚴重的缺點，即減毒活疫苗在抗原上與強毒菌株沒有大的區(qū)別，而布氏桿菌病監(jiān)測和檢疫中主要采取基于S-LPS抗原“O”鏈特異性抗體而建立的免疫學方法，因此，無法區(qū)分是自然感染還是人工免疫，這就很難得出正確的監(jiān)測和檢疫的結果，給檢測和檢疫帶來很大的困難。
　　 如何解決現有疫苗的這以主要問題，對于布氏桿菌病的防控具有重要的意義。
　　 BP26蛋白是布氏桿菌的一個非常重要

3、的診斷抗原，已有很多用此抗原來進行布氏桿菌診斷的報道。BP26 蛋白作為布氏桿菌的一個周質蛋白，對布氏桿菌的毒力不起決定性的作用，但確是布氏桿菌的一個優(yōu)勢抗原，能夠誘導高滴度的抗體。BP26蛋白的這些特性，為我們進行研究基因標記疫苗研究提供了很好的靶標。如果對該抗原進行缺失標記，將為鑒別診斷方法的建立提供標識序列。
　　 因此，本項目擬利用同源重組的方法，對牛流產布氏桿菌S19弱毒疫苗進行改造，構建成bp26 基因缺失的標記疫苗

4、株，命名為S19-△26。小鼠感染模型表明，標記疫苗株S19-△26與親本株S19具有同樣的安全性，殘留毒力沒有因BP26 蛋白的缺失而發(fā)生改變，同時S19-△26免疫的小鼠一直沒有出現BP26 特異性抗體，為鑒別診斷提供可行性。在小鼠免疫保護試驗中，S19-△26和S19接種的小鼠具有同樣抵抗S544強毒菌株攻擊的能力。S19-△26具備從血清學角度區(qū)分S19-△26免疫與野生型布氏桿菌感染，對布氏桿菌病防制、監(jiān)測及凈化具有重要的意義