小鼠腺苷酸環(huán)化酶Ⅲ缺失對部分嗅覺受體和相關分子表達的影響.pdf

1、主要嗅表皮（MOE）結構完整性是嗅覺感知的基礎，而氣味誘導的嗅覺神經(jīng)元（ORNs）活動是嗅覺系統(tǒng)形成和維持的關鍵因素。嗅覺受體（ORs）是神經(jīng)元活動的起點，負責結合氣味分子并向下游傳遞信號。腺苷酸環(huán)化酶Ⅲ（AC3）是催化生成第二信使cAMP的最主要的酶，在嗅覺通路中位于ORs的下游。AC3敲除小鼠嗅覺能力及嗅覺相關行為喪失，大量嗅覺相關基因表達異常。在小鼠生后的發(fā)育過程中，AC3缺失具體如何影響ORs及相關分子的表達，尚待研究。為了探討

2、AC3缺失與小鼠生后MOE發(fā)育缺陷的關系，本文采用HE技術對出生后不同年齡AC3-/-型和AC3+/+小鼠的MOE組織進行染色，觀察AC3缺失對MOE形態(tài)發(fā)育的影響；采用熒光原位雜交（FISH）技術對AC3-/-和野生型小鼠 MOE進行 OMP、OR基因的雜交，以明確AC3缺失對ORNs發(fā)育成熟和ORs表達的影響；并對MOE發(fā)育及ORs表達相關的轉錄因子Lhx2和Emx2、轉運蛋白RTP、輔助蛋白REEP1以及偶聯(lián)G蛋白輔助因子Ric-

3、8b進行差異表達分析。發(fā)現(xiàn)AC3缺失對MOE組織出生后發(fā)育和OR表達的重要影響。
　　本研究主要內容包括：⑴AC3缺失導致小鼠出生后至成年的發(fā)育過程中 MOE厚度逐漸變薄，成熟 ORNs數(shù)量逐漸減少，至小鼠成年時MOE嚴重受損。⑵對AC3-/-小鼠MOE中ORs基因的表達進行分析，發(fā)現(xiàn)ORs在MOE發(fā)育過程中，OR+-ORNs數(shù)量極顯著下調，單個ORNs亮度也明顯減弱，且下調隨年齡增加漸趨嚴重，而表達區(qū)域未發(fā)生改變。⑶對MOE中R