復(fù)方“前愈”治療慢性前列腺炎化學(xué)部位提取及含量測定.pdf

1、目的：
　　 改善蜈蚣的給藥方式,比較該動物藥合煎、后下及水煮、超聲提取時,蛋白含量及蛋白凝膠譜帶特征的變化;對所含多糖部位、黃酮部位、皂苷部位、生物堿部位進(jìn)行提取和含量測定,為動物實驗有效部位和體內(nèi)作用過程研究提供工藝基礎(chǔ)。
　　 方法：
　　 應(yīng)用考馬斯亮藍(lán)—紫外分光光度法測定提取液中蛋白含量;采用聚丙烯凝膠電泳技術(shù)獲得提取液總蛋白凝膠電泳譜帶;t檢驗分析蛋白含量和凝膠電泳譜帶特征。
　　 利用不同化

2、學(xué)部位在不同極性溶劑中的溶解度差異,同時提取多糖、皂苷、黃酮、生物堿。根據(jù)化學(xué)部位特征基團(tuán)與某些試劑的顯色反應(yīng),定性鑒別。
　　 單因素和多因素正交試驗優(yōu)選多糖含量最高的提取方式,苯酚—濃硫酸顯色反應(yīng)后,紫外分光光度法檢測多糖含量。大孔吸附樹脂純化皂苷,以黃芪甲苷為對照品,香草醛乙酸—高氯酸顯色反應(yīng)后,紫外分光光度法測定皂苷含量。聚酰胺純化后,淫羊藿苷為對照品,紫外分光光度法測定總黃酮和淫羊藿苷含量。
　　 結(jié)果：

3、>　　 超聲相同時間的總蛋白含量均高于水煎煮,約為其2倍,超聲法聚丙烯凝膠電泳的灰度值也大于水煎煮;煎煮或超聲30min的蛋白含量和聚丙烯凝膠電泳灰度值均高于提取15min或45min;蜈蚣合煎比后下得到的總蛋白含量和聚丙烯凝膠電泳灰度值均較高,且越早加入,得到的越多.
　　 多糖、皂苷、黃酮、生物堿可以被同時提取出來,且特征鑒別反應(yīng)為陽性。
　　 多糖部位正交試驗的最佳工藝為:溶媒用量為原藥材的9倍,2450MHz超