Semaphorion 3A對(duì)兔下頜骨牽張成骨新骨形成的影響.pdf

1、背景和目的:
　　牽張成骨(DO)是在骨骼切開后保留骨膜以及附著于表面的血液供給骨段，對(duì)這段骨骼施加恒定的牽張力后可促進(jìn)牽張的間隙中形成新骨。這一技術(shù)既避免了供區(qū)創(chuàng)傷及骨移植術(shù)的各種并發(fā)癥又使軟組織同步延長，為傳統(tǒng)方法不能解決的臨床問題提供了新的思路。這是一種內(nèi)源性的組織工程技術(shù)，在臨床頜面骨矯正和面部骨骼缺損畸形的治療中應(yīng)用廣泛，是顱頜面整復(fù)外科領(lǐng)域幾十年來重大進(jìn)展之一。但牽張成骨作為一種新興組織工程技術(shù)，在許多方面還需要深入的

2、探索和研究，仍存在固定期時(shí)間過長、新骨形成不良等弊端，從而嚴(yán)重影響了該技術(shù)在臨床的推廣和使用。探索DO骨再生的細(xì)胞和分子機(jī)制，彌補(bǔ)牽張成骨治療的缺點(diǎn)，促進(jìn)骨骼再生與骨骼的礦化，從根本上縮短治療的周期，是目前國內(nèi)外學(xué)者正努力探索的一個(gè)重要前沿課題。
　　有研究表明，骨組織的新陳代謝和新生作用受到神經(jīng)的支配，Semaphorion3A是一種神經(jīng)軸突導(dǎo)向性分子，是成骨細(xì)胞分泌的一種蛋白質(zhì)，該蛋白具有調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞生理活動(dòng)的作用，并且在感覺

3、神經(jīng)支配中具有重要作用，對(duì)骨骼的新生和改建具有直接或間接的調(diào)節(jié)作用。在進(jìn)行全身治療時(shí)，Semaphorion3A在骨骼的愈合中還具有其他功能，如進(jìn)行干細(xì)胞生理活動(dòng)的調(diào)節(jié)、進(jìn)行血小板活性的調(diào)節(jié)等?？偟膩碚fSemaphorion3A蛋白在骨骼重塑中扮演了重要的角色，所以在骨骼疾病的治療中是一種具有較大發(fā)展?jié)摿Φ陌袠?biāo)物質(zhì)。
　　本次實(shí)驗(yàn)在建立兔單側(cè)下頜骨牽張成骨動(dòng)物模型后，研究外源性Semaphorion3A對(duì)于牽張成骨的成骨效應(yīng)的影響

4、，為促進(jìn)牽張成骨新骨形成和礦化，提高牽張間隙內(nèi)的成骨質(zhì)量，縮短牽張成骨治療周期提供科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，改進(jìn)傳統(tǒng)治療的不足之處，通過客觀的數(shù)據(jù)分析，奠定臨床應(yīng)用的基礎(chǔ)。
　　方法:
　　1.動(dòng)物模型的建立:選取20只5-6個(gè)月齡的健康的新西蘭大白兔，體重2～3kg，雌雄不限。全麻下在頦孔后方0.5～1厘米處切開下頜骨，固定內(nèi)置式牽張器。每旋轉(zhuǎn)一圈，牽張距離為0.4mm。延遲期為6天，從第7天開始，每天上午10點(diǎn)和下午8點(diǎn)各牽張0.

5、4mm，連續(xù)牽張10天，固定牽張器。
　　2.Semaphorion3A對(duì)牽張成骨新骨形成的影響:模型建立成功后，將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為A、B兩組，A組為空白對(duì)照組;B組為實(shí)驗(yàn)組，在牽張期第1、5、10天在牽張間隙內(nèi)注射SEMA3A(500μg/Kg)。在固定期第2周和第6周分別獲取下頜骨標(biāo)本，利用X線及組織形態(tài)計(jì)量學(xué)檢測(cè)等技術(shù)觀察比較外源性Semaphorion3A對(duì)于牽張成骨的成骨效應(yīng)的影響。
　　3.成骨效果檢測(cè):獲取兔下

6、頜標(biāo)本后立即行牽張區(qū)域骨密度的X線檢查。在光鏡下觀察每個(gè)組織標(biāo)本的6張HE染色的不連續(xù)切片，其觀察指標(biāo)包括成骨細(xì)胞的生長情況以及骨小梁的數(shù)量和大小、骨小梁排列的方向。在觀察以后進(jìn)行拍照保存，使用圖像處理軟件對(duì)骨骼組織進(jìn)行形態(tài)計(jì)量學(xué)分析，以新生骨量和骨小梁厚度作為測(cè)量參數(shù)，測(cè)量每個(gè)標(biāo)本的6張不連續(xù)切片，測(cè)量參數(shù)值為均數(shù)。
　　4.統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)分析:對(duì)實(shí)驗(yàn)過程中的牽張器對(duì)骨密度的影響和骨形態(tài)的變化進(jìn)行量化統(tǒng)計(jì)。數(shù)據(jù)采集及統(tǒng)計(jì)均采用盲法。計(jì)

7、量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用t檢驗(yàn)進(jìn)行組間數(shù)據(jù)比較，對(duì)每組各時(shí)間點(diǎn)的差異進(jìn)行統(tǒng)計(jì)并比較。本次選用的統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件為SPSS19.0，對(duì)完全隨機(jī)的模型樣本進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，分析結(jié)果P＜0.05為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　本次實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M中選用的動(dòng)物模型對(duì)手術(shù)的耐受程度較高，并且手術(shù)牽張后存活率為100％，模型兔大小便和飲食狀況良好，在進(jìn)行了牽張手術(shù)后出現(xiàn)了不同程度的偏頜。使用X射線進(jìn)行影像學(xué)檢查，發(fā)現(xiàn)注射Sema3A組的動(dòng)物模