沒食子酸體外抗人四型腺病毒(HAdV--4)作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：探索沒食子酸(Gallic acid，GA)對(duì)人四型腺病毒(Human adenovirus type four，HAdV-4)的體外抑制作用及其機(jī)制。
　　方法：通過采用細(xì)胞培養(yǎng)，細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE，cytopathic effect)觀察等實(shí)驗(yàn)來確定沒食子酸的安全用藥范圍，采用SPSS軟件probit回歸求得最大無毒濃度(TC0)，半數(shù)中毒濃度(TC50); TCID50法測(cè)定腺病毒的毒力;MTT細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)測(cè)得沒食子

2、酸對(duì)腺病毒的體外抑制作用;實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)來測(cè)定沒食子酸對(duì)腺病毒基因拷貝數(shù)的影響;蛋白免疫印跡法(western blot)檢測(cè)沒食子酸對(duì)腺病毒蛋白外殼合成的抑制作用。
　　結(jié)果：沒食子酸對(duì)A549細(xì)胞的最大無毒濃度為TC0=32.75μM，半數(shù)中毒濃度TC50=279.906μM。采用Reed-Munch法計(jì)算HAdV-4在A549細(xì)胞中的TCID50為10-6.5/100μL。MTT法測(cè)得在四種加藥方式對(duì)腺病毒的抑制率分

3、別為:滅活作用(73.19％*)＞吸附抑制作用(59.68％*)＞生物合成抑制作用(13.06％*)＞對(duì)細(xì)胞的保護(hù)作用(3.15％＃)((*P＜0.05)，(＃P＞0.05))。實(shí)時(shí)熒光定量PCR法和western blot法測(cè)得其對(duì)腺病毒的抑制作用與MTT法基本一致。
　　結(jié)論：沒食子酸抗人四型腺病毒作用主要在于其體外滅活病毒，從而影響病毒對(duì)細(xì)胞的吸附作用;其次對(duì)人四型腺病毒在生物合成階段有一定抑制作用，包括可以抑制腺病毒的核酸