家蠶卵色限性品種(W-1)蠶卵的發(fā)育后期及蟻蠶蛋白質(zhì)組的研究.pdf

1、家蠶是完全變態(tài)昆蟲，一生中要經(jīng)過(guò)卵、幼蟲、蛹和成蟲4個(gè)形態(tài)完全不同的發(fā)育階段。對(duì)卵期胚胎發(fā)育不同時(shí)期的蛋白質(zhì)時(shí)間和空間的表達(dá)差異已經(jīng)有大量的研究，但對(duì)家蠶卵期和蟻蠶性別差異性表達(dá)的研究報(bào)道很少。
　　 本研究利用雙向電泳和質(zhì)譜相結(jié)合的蛋白質(zhì)組學(xué)的研究方法利用家蠶卵色限性品種(W-1)對(duì)催青后期胚胎和蟻蠶進(jìn)行雌雄性別差異蛋白質(zhì)的研究，找出性別生理差異蛋白，結(jié)合家蠶數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行質(zhì)譜鑒定，進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)性別會(huì)影響家蠶胚胎發(fā)育過(guò)程中器官和組織

2、蛋白質(zhì)的合成，獲得的主要結(jié)果如下：
　　 1．W-1蠶卵不同發(fā)育階段的形態(tài)圖
　　 用氫氧化鉀脫殼法成功解剖了家蠶品種W-1雌雄卵各個(gè)時(shí)期的胚胎，采用倒置顯微鏡拍攝了照片。為后續(xù)實(shí)驗(yàn)材料做了充分的前期準(zhǔn)備。并且將雌雄胚胎分別解剖出來(lái)。
　　 2家蠶品種W-1己3期雌雄卵可溶性蛋白質(zhì)表達(dá)譜的研究
　　 2.1家蠶品種W-1己3期雌雄卵可溶性蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜的建立
　　 用蛋白質(zhì)雙向電泳技術(shù)對(duì)己3期

3、家蠶卵可溶性蛋白進(jìn)行了蛋白質(zhì)組分的比較分析。結(jié)果顯示：雄卵和雌卵分別檢測(cè)到317和335個(gè)斑點(diǎn)，能互相匹配的蛋白點(diǎn)273對(duì)。其中雄卵特異斑點(diǎn)44個(gè)，雌卵特異斑點(diǎn)62個(gè)。這些差異蛋白的出現(xiàn)，顯示雌雄蠶卵可溶性蛋白質(zhì)組分存在差異。
　　 2.2家蠶品種W-1己3雌雄卵可溶性蛋白表達(dá)譜差異蛋白的質(zhì)譜鑒定
　　 特征蛋白進(jìn)行了基質(zhì)輔助質(zhì)量飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF MS)分析，已鑒定的蛋白包括家蠶未知的角蛋白、原肌球蛋白同

4、源體5、Sqd基因編碼的RNA結(jié)合蛋白、轉(zhuǎn)膠蛋白、熱激蛋白20.4、原肌球蛋白1和與果蠅同源的Tm1蛋白。進(jìn)一步說(shuō)明性別會(huì)影響胚胎器官和組織蛋白質(zhì)的合成。
　　 3家蠶品種W-1己4期雌雄卵蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜比較分析
　　 用蛋白質(zhì)雙向電泳技術(shù)對(duì)己4期家蠶卵蛋白進(jìn)行了蛋白質(zhì)組分的比較分析。結(jié)果顯示：雄性蠶卵蛋白樣品中共檢測(cè)到486個(gè)蛋白斑點(diǎn)，雌性蠶卵蛋白樣品中共檢測(cè)到427個(gè)蛋白斑點(diǎn)，雌雄能匹配的蛋白斑點(diǎn)有380對(duì)，匹配

5、率達(dá)到81.29％。其中雄性特異蛋白斑點(diǎn)106個(gè)，占總蛋白斑點(diǎn)數(shù)的21.81%。而雌性特異蛋白斑點(diǎn)47個(gè)，占總蛋白斑點(diǎn)數(shù)的11.01%。
　　 4家蠶品種W-1己5期雌雄卵蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜比較分析
　　 對(duì)胚胎己5期雌雄卵蛋白質(zhì)用雙向電泳的技術(shù)和方法進(jìn)行蛋白組分的比較分析。結(jié)果顯示：雄性蠶卵蛋白樣品中共檢測(cè)到471個(gè)蛋白斑點(diǎn)，雌性蠶卵蛋白樣品中共檢測(cè)到432個(gè)蛋白斑點(diǎn)，雌雄能匹配的蛋白斑點(diǎn)有395對(duì)，匹配率達(dá)到84.2

6、7%。其中雄性特異蛋白斑點(diǎn)76個(gè)，而雌性特異蛋白斑點(diǎn)37個(gè)。
　　 5家蠶卵色限性品種(W-1)雌雄蟻蠶蛋白質(zhì)表達(dá)譜的研究
　　 5.1家蠶品種W-1雌雄蟻蠶蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜的建立
　　 應(yīng)用雙向電泳和圖像分析技術(shù)，研究家蠶品種W-1雌雄蟻蠶的總蛋白的差異。結(jié)果顯示：雄蟻和雌蟻分別檢測(cè)到478和444個(gè)蛋白點(diǎn)，能相互匹配的蛋白點(diǎn)為410對(duì)，占88.57%，雄蟻特異斑點(diǎn)有68個(gè)，雌蟻有34個(gè)。這些差異蛋白的出現(xiàn)，