二甲雙胍通過激活A(yù)MPK抑制肥胖引起的脂肪組織纖維化和胰島素抵抗.pdf

1、目的：研究脂肪組織纖維化的發(fā)生機(jī)制，探索二甲雙胍能否抑制脂肪組織纖維化及其與胰島素抵抗的關(guān)系。
　　方法：（1）收集肥胖和非肥胖人群大網(wǎng)膜脂肪組織，驗(yàn)證肥胖與脂肪組織纖維化相關(guān)，初步探索纖維化的發(fā)生機(jī)制；（2）給予ob/ob肥胖小鼠和高脂高糖飲食致肥胖的小鼠二甲雙胍治療，觀察二甲雙胍能否抑制肥胖狀態(tài)下脂肪組織纖維化，并尋找二甲雙胍作用的分子機(jī)制；（3）提取野生型小鼠附睪脂肪中血管基質(zhì)部分(SVF)細(xì)胞，在TGF-β1造成的細(xì)胞纖維

2、化模型基礎(chǔ)上，研究二甲雙胍抑制纖維化是否通過AMPK實(shí)現(xiàn)；（4）誘導(dǎo)3T3-L1細(xì)胞為成熟脂肪細(xì)胞，借此初探二甲雙胍抑制脂肪組織纖維化是否與改善胰島素抵抗相關(guān)。
　　結(jié)果：（1）肥胖人群脂肪組織發(fā)生間質(zhì)纖維化，TGF-β1、α-SMA、TIMP-1等纖維化關(guān)鍵調(diào)控蛋白表達(dá)增加，同時(shí)脂肪組織AMPK磷酸化受抑制；（2）二甲雙胍不僅使肥胖小鼠體重減輕、全身胰島素抵抗緩解，還明顯抑制脂肪組織纖維化；（3）二甲雙胍促進(jìn)肥胖小鼠脂肪組織AM

3、PK活性，并抑制TGF-β1信號(hào)通路；（4）在TGF-β1造成的SVF細(xì)胞纖維化模型中，二甲雙胍、AICAR等AMPK藥物激動(dòng)劑能夠抑制纖維化生成和降解相關(guān)蛋白的異常激活；（5）轉(zhuǎn)染Ad-CA-AMPK至SVF細(xì)胞，使活性AMPK持續(xù)高表達(dá)，能夠抑制TGF-β1促纖維化的作用；（6）轉(zhuǎn)染Ad-DN-AMPK至SVF細(xì)胞，抑制活性AMPK的表達(dá)，此時(shí)二甲雙胍和AICAR失去抑制TGF-β1促纖維化的作用；（7）在3T3-L1脂肪細(xì)胞中，二