白細(xì)胞介素-34抑制乙型肝炎病毒的復(fù)制.pdf

1、目的：
　　初步研究白細(xì)胞介素-34(IL-34)在乙型肝炎病毒(HBV)復(fù)制中的作用。
　　方法：
　　1.比較總蛋白、白蛋白、ALT、AST、TB、DB、AFP在79例慢性乙肝患者和105例健康人群中的血清學(xué)濃度差異。
　　2.通過(guò)ELISA檢測(cè)IL-34在慢性乙肝患者和健康體檢者血液中的表達(dá)差異。通過(guò)qRT-PCR檢測(cè)IL-34 mRNA水平在慢性乙肝患者和健康對(duì)照者外周血單個(gè)核細(xì)胞中的表達(dá)差異。通過(guò)qRT

2、-PCR和ELISA在多個(gè)HBV復(fù)制細(xì)胞模型中驗(yàn)證HBV復(fù)制對(duì)IL-34表達(dá)的影響。
　　3.收集慢性乙肝患者的臨床病理和預(yù)后資料，利用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件回顧性分析IL-34的表達(dá)水平與HBV DNA、ALT、AST、TB、DB、AFP的相關(guān)性。
　　4.采用不同濃度rhIL-34處理 HBV復(fù)制細(xì)胞系HepAD38和HepG2.2.15后，通過(guò)real-time PCR和Southern blotting檢測(cè)HBV復(fù)制中間體的表達(dá)

3、水平，通過(guò)qRT-PCR檢測(cè)total RNA和3.5kb mRNA的表達(dá)水平，采用Western blotting分析HBV核心蛋白表達(dá)水平。
　　5.通過(guò)尾靜脈向HBV轉(zhuǎn)基因小鼠注射rhIL-34后，采用real-timePCR檢測(cè)血液中 HBV DNA的變化情況；通過(guò)qRT-PCR檢測(cè)肝臟中HBV DNA、total RNA和3.5 kb mRNA的表達(dá)水平，采用Western blotting分析HBV核心蛋白表達(dá)水平。<

4、br>　　結(jié)果：
　　1.與健康人群相比，慢性乙肝患者血液中總蛋白、白蛋白濃度顯著降低，而ALT、AST、TB、DB、AFP的濃度顯著升高。
　　2.IL-34在慢性乙肝患者中的表達(dá)水平較健康對(duì)照組顯著降低；在多個(gè)HBV復(fù)制細(xì)胞模型中發(fā)現(xiàn)HBV復(fù)制抑制IL-34的表達(dá)。
　　3.分析慢性乙肝患者的臨床病理和預(yù)后資料發(fā)現(xiàn)，IL-34的水平與HBV DNA、ALT、AST的水平呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。
　　4.在HBV復(fù)制細(xì)胞