地爾硫卓對(duì)大鼠心肌挫傷后心功能障礙的保護(hù)效應(yīng)與機(jī)制研究.pdf

1、隨著道路交通的發(fā)展，交通事故已日益成為威脅人類生命安全的世界性公害，全世界的交通事故平均每年造成120萬人死亡，中國一年內(nèi)因車禍喪生的人數(shù)已超過十萬，成為交通事故多發(fā)國家。在交通事故中，單純胸部創(chuàng)傷與復(fù)合傷中的胸部創(chuàng)傷總的發(fā)生率超過1/3，是臨床僅次于顱腦損傷的第二位外傷致死因素。交通事故中對(duì)胸部的高速撞擊常造成心臟損傷，鈍性胸部創(chuàng)傷（Blunt chest trauma，BCT）所致的心臟損傷臨床發(fā)生率約8-76％，其中以心肌挫傷（M

2、yocardiAlcontusion，MC）最常見。在臨床上，MC 因其發(fā)病隱秘，且缺乏診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”，特別是在患者合并其他系統(tǒng)的嚴(yán)重傷情時(shí)，往往容易忽略心臟損傷的嚴(yán)重性。目前對(duì)心臟撞擊傷的研究主要針對(duì)胸部撞擊后心臟損傷的診斷及嚴(yán)重?fù)p傷致心臟大血管破裂急救方面的研究，而對(duì)撞擊后中至重度的心肌挫傷及其繼發(fā)的心臟功能障礙方面的研究較少。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)中至重度MC后可出現(xiàn)心功能障礙，傷后2-4h 尤為明顯，至傷后24h 左心室收縮壓已可恢

3、復(fù)至傷前水平，舒張功能的恢復(fù)時(shí)間還要延長，同時(shí)研究還發(fā)現(xiàn)，MC后受損的心肌細(xì)胞出現(xiàn)鈣超載現(xiàn)象，鈣超載尤以傷后4～8h為明顯，傷后24h 胞內(nèi)游離鈣離子（[Ca2+]I）濃度仍高于傷前。MC后心臟功能障礙與鈣超載的發(fā)生機(jī)制目前尚不明了。
　　 本實(shí)驗(yàn)在建立大鼠胸部撞擊傷致心臟中至重度損傷動(dòng)物模型的基礎(chǔ)上，應(yīng)用鈣通道阻滯劑地爾硫卓進(jìn)行干預(yù)，觀察其在傷后不同時(shí)相點(diǎn)減輕細(xì)胞鈣超載、保護(hù)心功能方面的作用，并進(jìn)一步從細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)的破壞方面探

4、討MC后心功能障礙的發(fā)生機(jī)制，為臨床診斷和治療此類患者提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 主要方法：因?yàn)镸C患者傷情多較重，不適宜行臨床研究，本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用自制的BIM-Ⅲ小型多功能生物撞擊機(jī)建立大鼠胸部撞擊致中至重度心肌挫傷動(dòng)物模型，應(yīng)用大體解剖AIS 評(píng)分系統(tǒng)+左心室置管心功能檢測(cè)綜合評(píng)價(jià)致傷效果。于傷后應(yīng)用鈣通道阻滯劑地爾硫卓進(jìn)行干預(yù)，通過監(jiān)測(cè)傷后心功能的變化情況及細(xì)胞內(nèi)[Ca2+]I濃度，評(píng)價(jià)MC后應(yīng)用地爾硫卓在改善心功能、保護(hù)受損

5、心肌方面的作用；應(yīng)用Western blot和RT-PCR 方法對(duì)心肌細(xì)胞結(jié)蛋白及結(jié)蛋白mRNA表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，評(píng)估心肌細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)的破壞情況，通過傷后用藥組與非用藥組的比較，進(jìn)一步探討其與傷后心肌細(xì)胞鈣超載及心臟收縮舒張功能障礙發(fā)生的關(guān)系。
　　 主要結(jié)果：①應(yīng)用BIM-Ⅲ小型多功能生物撞擊機(jī)以220Kpa 驅(qū)動(dòng)壓驅(qū)動(dòng)彈頭對(duì)大鼠胸部劍突左側(cè)0.5cm 處撞擊，所建立的大鼠胸部撞擊致心臟損傷動(dòng)物模型在傷后2h出現(xiàn)心功能下降、血流動(dòng)

6、力學(xué)紊亂，心臟損傷的AIS 評(píng)分4-5分，符合胸部撞擊傷中至重度心肌挫傷的臨床特征。②大鼠傷后心肌細(xì)胞內(nèi)[Ca2+]I 顯著升高，傷后4h 達(dá)峰值后開始下降，但24h后仍高于正常（P<0.05），傷后應(yīng)用地爾硫卓（D組）可顯著降低傷后4-12h細(xì)胞內(nèi)[Ca2+]I濃度；動(dòng)物致傷初期出現(xiàn)心率下降，而后逐步升高，傷后8h 心率最快、24h 仍低于正常，D組顯著降低動(dòng)物傷后4-12h 心率（P<0.01）；單純致傷（T組）左心室收縮期末壓(L

7、VESP)明顯降低，4h 達(dá)最低值后開始上升，傷后24h恢復(fù)至傷前水平， D組LVESP與T組對(duì)比無明顯變化；T組左心室舒張期末壓(LVEDP）傷后升高，4h 達(dá)峰值，此后下降，但傷后24h 仍未恢復(fù)至傷前水平，D組傷后24h降至正常范圍。T ③組心肌細(xì)胞結(jié)蛋白的表達(dá)降低，傷后8h 最低，但傷后24h 結(jié)蛋白表達(dá)增高明顯，至傷后48h 其表達(dá)量高于傷前（P<0.05）；結(jié)蛋白mRNA 傷后呈逐步增高趨勢(shì)，傷后24h 達(dá)峰值，D組結(jié)蛋白在

8、傷后8h表達(dá)高于T組（P<0.01）、48h 低于T組（P<0.05），結(jié)蛋白mRNA在傷后24-48h 低于T組（P<0.05）；心肌組織結(jié)蛋白免疫組化顯示，傷后心肌細(xì)胞結(jié)蛋白表達(dá)在傷后初期呈灶狀缺失，且隨時(shí)間延長其表達(dá)降低，但傷后48h 結(jié)蛋白表達(dá)明顯增強(qiáng)出現(xiàn)雜亂聚集。
　　 結(jié)論：①本實(shí)驗(yàn)建立的大鼠胸部撞擊致心臟損傷動(dòng)物模型具有模擬傷情穩(wěn)定，操作簡(jiǎn)便，可重復(fù)性良好等特點(diǎn)；MC ②后早期應(yīng)用鈣通道阻滯劑地爾硫卓能顯著降低傷后