2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:
  1.通過空白添加、動(dòng)物實(shí)驗(yàn),探索單克隆試紙對(duì)血液中苯二氮類;巴比妥類;毒品類等藥(毒)藥物篩選的檢測(cè)閾值及LC-MS/MS確認(rèn)方法的研究;
  2.通過實(shí)際案例驗(yàn)證單克隆試紙用于血液中苯二氮類;巴比妥類;毒品類等藥(毒)物篩選的可靠性。
  方法:
  1.血液用單克隆免疫金標(biāo)試紙檢測(cè)前的處理方法的研究
  通過血液空白添加實(shí)驗(yàn),分析了不同pH值緩沖液條件、不同離心轉(zhuǎn)速以及不同溫度下對(duì)血液前處理

2、的影響,得到血液中不同藥物的檢測(cè)閾值。
  2.動(dòng)物實(shí)驗(yàn),建立血液篩選的檢測(cè)閾值及檢驗(yàn)方法的研究
  稱重,按大鼠的LD50給動(dòng)物灌胃,在動(dòng)物血液藥物濃度達(dá)到最大值時(shí)解剖取血液,按照第二部分的血液前處理,使用單克隆免疫金標(biāo)試紙檢測(cè)血液藥物濃度,結(jié)果呈陽性,則減少1/2灌胃劑量,直至單克隆免疫金標(biāo)試紙呈陰性。這時(shí),陰性結(jié)果的前一次陽性灌胃劑量就是現(xiàn)有單克隆免疫金標(biāo)試紙檢測(cè)所能達(dá)到的最低血液藥物濃度。
  取1mL的動(dòng)物血

3、液,加9mL乙酸乙酯,振蕩,超聲5min,離心,取上清液于蒸發(fā)皿中,60℃水浴揮干,加1mL的乙腈復(fù)溶,有機(jī)膜過濾,LC-MS/MS檢測(cè)分析,得到血液藥物濃度。
  3.通過實(shí)際案例驗(yàn)證單克隆免疫金標(biāo)試紙應(yīng)用于血液中藥物篩選的可靠性研究
  實(shí)際案例的血液經(jīng)過上述的前處理,使用單克隆免疫金標(biāo)試紙檢測(cè)和LC-MS/MS檢測(cè)驗(yàn)證,得出結(jié)果。
  結(jié)果:
  1.使用單克隆免疫金標(biāo)試紙對(duì)血液進(jìn)行藥(毒)物篩選時(shí),有必要

4、向血液中加入磷酸鹽緩沖液,這樣能得到較好的檢測(cè)結(jié)果。另外,V(血液):V(磷酸鹽緩沖液)=1:1進(jìn)行等量添加,效果最好。
  2.使用Sigma3-30K高速臺(tái)式冷凍離心機(jī)在12000轉(zhuǎn)、4℃條件下離心處理得到的檢測(cè)限最低,檢測(cè)效果最好,在條件允許時(shí)最好在篩選時(shí)選用高速冷凍離心機(jī)離心,能夠獲得最佳結(jié)果。但是這種離心機(jī)成本高、普及率低,因此,一般使用低速離心機(jī)也是可以的。
  3.磷酸鹽緩沖液的pH值對(duì)各類藥物檢測(cè)閾值的影響不

5、一致,其中對(duì)氯硝安定和氯胺酮的影響較大。
  4.實(shí)際案例。2012-2013年的38個(gè)實(shí)際案例的LC-MS/MS檢驗(yàn)結(jié)果與用單克隆免疫金標(biāo)試紙檢測(cè)結(jié)果相比較,其中的89.47%結(jié)果一致。
  結(jié)論:
  1、用于尿液篩選的單克隆免疫金標(biāo)試紙?jiān)趹?yīng)用于血液檢材的篩選時(shí)差別不大。
  2、使用磷酸鹽緩沖液稀釋血液,用高速冷凍離心機(jī)離心,取上清液用于單克隆免疫金標(biāo)試紙篩選血液能夠獲得較好的結(jié)果。
  3、根據(jù)空白

6、實(shí)驗(yàn)結(jié)果,在使用單克隆免疫金標(biāo)試紙篩選血液中苯二氮類藥物時(shí),應(yīng)注意分別使用pH6-8及pH11兩種緩沖液分別稀釋血液后進(jìn)行篩選,以免漏掉氯硝安定這種需要在堿性條件下才能用單克隆免疫金標(biāo)試紙較好篩選出的藥物。
  4、使用單克隆免疫金標(biāo)試紙篩選血液中巴比妥類藥物時(shí),使用pH6-8的緩沖液稀釋血液可以滿足檢測(cè)需要。
  5、在使用單克隆免疫金標(biāo)試紙篩選血液中的毒品時(shí),嗎啡類、苯丙胺類使用緩沖液pH6-8,均可滿足檢測(cè)要求,但氯胺

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