版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、白斑病對對蝦水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成巨大損失,其病原為白斑綜合癥病毒(white spotsyndrome virus,WSSV)。在侵染宿主的過程中,其囊膜蛋白VP28起著關(guān)鍵作用。有報道重組表達的VP28或表達VP28的質(zhì)粒具有明顯的抗病毒作用;而囊膜蛋白VP19在有些研究中表明其有抗病毒作用,也有的研究顯示其無抗病毒作用。為了深入了研究VP28的抗病毒功能,尋找一種有效地防治方法,并確定VP19的功能,我們構(gòu)建了分別含WSSV的ie1啟動子
2、和VP19或VP28的表達載體(pIevp28,pIevp28)。將載體分別注射克氏原螯蝦后,通過實時定量PCR和蛋白質(zhì)印跡等方法發(fā)現(xiàn)不同的質(zhì)粒載體可以持續(xù)表達VP19或VP28,自第五天開始可以檢測到較強的信號并持續(xù)至第三十天,同時在遭遇病毒的侵染之后,與對照組相比注射VP28質(zhì)粒的螯蝦感染病毒后死亡率明顯下降,并且病毒在體內(nèi)的復(fù)制被抑制。而VP19質(zhì)粒雖然能夠在螯蝦體內(nèi)轉(zhuǎn)錄,但不能抑制病毒的復(fù)制,死亡率與對照組亦無明顯差異。免疫組織
3、化學(xué)的結(jié)果顯示VP28蛋白可以與血細胞的細胞膜結(jié)合,而VPl9則不能。根據(jù)上述結(jié)果,我們認為VP28可能是能通過競爭性抑制的作用對螯蝦進行保護。飼喂含有該質(zhì)粒的大腸桿菌(E.coli)同樣可以降低螯蝦的死亡率。這或許可以作為一種新的防治白斑病毒的方法加以應(yīng)用。
而后我們考慮到該質(zhì)粒是否可以用來表達螯蝦蛋白以研究其功能,于是選擇了來自克氏原螯蝦的一種C-型凝集素來進行實驗。C-型凝集素作為一種模式識別受體,在識別外來病原體侵
4、染等方面起著非常重要的作用。在我們的研究中,從克氏原螯蝦體內(nèi)克隆到一種新型的C-型凝集素,稱為PcLec4。PcLec4包括一個由17個氨基酸殘基組成的信號肽和緊隨其后的一個糖類識別結(jié)構(gòu)域(carbohydraterecognition domain,CRD)。在螯蝦受到白斑病毒或者鰻弧菌(Vibrio.anguillarum)的刺激之后,該C-型凝集素的mRNA水平上呈現(xiàn)明顯的上調(diào)趨勢。重組表達之后的該C-型凝集素蛋白不能凝集細菌,但
5、是在體外細菌結(jié)合試驗中,對無論革蘭氏陽性菌還是革蘭氏陰性菌都表現(xiàn)出很強的結(jié)合活性。重組表達后的蛋白可以促進機體對侵入體內(nèi)的鰻弧菌的清除,為了研究該凝集素的體內(nèi)活性,我們利用含有白斑綜合癥病毒的即刻早期基因(immediate-early gene)中的ie1啟動子核心區(qū)域的表達載體,將PcLec4的開放閱讀框插入該質(zhì)粒載體中ie1啟動子之后。該載體經(jīng)測試表明可以在螯蝦體內(nèi)過表達PeLec4,并且注射了該表達載體的螯蝦與對照組相比,當鰻弧
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 含對蝦白斑綜合癥病毒ie1啟動子的重組桿狀病毒介導(dǎo)的哺乳動物細胞基因轉(zhuǎn)移.pdf
- 對蝦白斑綜合癥病毒(WSSV)極早期基因啟動子的研究.pdf
- 凡納濱對蝦NF-κB功能研究及對白斑綜合癥(WSSV)極早期基因1(IE1)轉(zhuǎn)錄調(diào)控.pdf
- 一種啟動子探針載體的構(gòu)建及低溫誘導(dǎo)啟動子的研究.pdf
- 高強啟動子及其表達載體的研制.pdf
- 花粉-種子表達融合啟動子合成及其表達載體構(gòu)建.pdf
- 雙啟動子shRNA表達載體的構(gòu)建及其在抑制腫瘤增殖研究中的應(yīng)用.pdf
- HBV核心區(qū)啟動子反義真核表達載體的構(gòu)建.pdf
- 靛藍基因表達載體的構(gòu)建及香石竹CHS啟動子克隆研究.pdf
- 甘蔗莖桿特異表達基因啟動子的克隆及其植物表達載體的構(gòu)建.pdf
- 奶牛β-酪蛋白啟動子引導(dǎo)的乳腺高效定位表達載體的構(gòu)建與篩選.pdf
- PSG076啟動子啟動Barnase基因表達載體構(gòu)建及其遺傳轉(zhuǎn)化.pdf
- 擬南芥CBF1、CBF4基因及啟動子的克隆與植物表達載體的構(gòu)建.pdf
- 天藍色鏈霉菌強啟動子的構(gòu)建與應(yīng)用研究.pdf
- 小鼠αA晶體蛋白啟動子報告基因載體的構(gòu)建以及啟動子活性的檢測.pdf
- 枯草芽孢桿菌麥芽糖啟動子P△glvA整合表達載體的構(gòu)建及啟動子功能的初步探討.pdf
- 對蝦白斑綜合癥病毒(WSSV)膜蛋白VP52B的鑒定和功能研究及極早期基因啟動子的篩選.pdf
- 熱誘導(dǎo)啟動子HSP70B’調(diào)控的RNAi表達載體的構(gòu)建與鑒定.pdf
- 構(gòu)建帶有突變的載脂蛋白CⅡ啟動子的表達載體及體外表達研究.pdf
- 斑馬魚acta1啟動子的分離及其表達載體在構(gòu)建轉(zhuǎn)基因熒光魚中的應(yīng)用.pdf
評論
0/150
提交評論