電針對(duì)腦缺血再灌注模型大鼠NMDAR-NO-cGMP通路的影響.pdf

1、目的:通過觀察電針“百會(huì)”(DU20)、“大椎”(Du14)穴對(duì)大腦中動(dòng)脈閉塞(MCAO)再灌注模型大鼠神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分、腦組織形態(tài)的影響,以及對(duì)腦組織缺血側(cè)海馬區(qū)和紋狀體區(qū)NMDA(N-甲基-D-天門冬氨酸)受體蛋白表達(dá)及血清NO含量、cGMP、cAMP濃度的測定,評(píng)估電針對(duì)NMDAR-NO-cGMP通路的影響,進(jìn)一步探討電針治療缺血性腦血管病(ischemiccerebrovasculardisease,ICVD)的機(jī)理,為臨床治療提

2、供科學(xué)依據(jù),有利于針刺治療缺血性腦血管病的進(jìn)一步推廣應(yīng)用。
　　 方法:將39只成年雄性健康SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、電針組,每組各13只。采用改良Longa線栓法制備大腦中動(dòng)脈局灶性腦缺血再灌注模型。電針組取“百會(huì)”及“大椎”兩穴,采用連續(xù)波刺激30min,電流強(qiáng)度1～3mA,電壓:1-3V,頻率3Hz。采用Julio氏神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分法對(duì)腦缺血再灌注24h后大鼠進(jìn)行評(píng)分,利用光學(xué)顯微鏡觀察HE染色下的腦組織形態(tài)結(jié)構(gòu),應(yīng)

3、用免疫組織化學(xué)方法,觀察大鼠腦組織受損側(cè)海馬區(qū)、紋狀體區(qū)NMDA受體表達(dá);應(yīng)用硝酸還原酶法,檢測大鼠血清NO含量;應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法,觀察大鼠血清cGMP、cAMP濃度的變化,并對(duì)cAMP/cGMP相對(duì)比值的變化進(jìn)行比較分析。
　　 結(jié)果:1.與假手術(shù)組相比,模型組和電針組大鼠神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分皆顯著降低(P＜0.01),而給予電針治療后大鼠的神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分較模型組顯著升高(P＜0.01)。
　　 2.假手術(shù)組大鼠腦組織海馬

4、區(qū)及紋狀體區(qū)均有大量神經(jīng)細(xì)胞分布,顆粒細(xì)胞呈橢圓形,細(xì)胞漿不豐富,核質(zhì)比大,核淡染清晰,細(xì)胞排列整齊;未見炎性細(xì)胞浸潤及細(xì)胞空泡變性和細(xì)胞壞死。與假手術(shù)組相比,模型組大鼠腦組織海馬區(qū)及紋狀體區(qū)細(xì)胞排列分布不均勻,結(jié)構(gòu)紊亂,許多細(xì)胞胞體縮小、胞核固縮、少數(shù)顆粒細(xì)胞深染,結(jié)構(gòu)模糊;而給予電針治療后大鼠腦組織海馬區(qū)及紋狀體區(qū)神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)核固縮現(xiàn)象減輕,大小接近假手術(shù)組,排列較模型組整齊,接近于假手術(shù)組。
　　 3.與假手術(shù)組比較,模型組

5、大鼠腦組織海馬及紋狀體中NMDA受體亞型NR2A蛋白表達(dá)顯著降低,NR2B蛋白表達(dá)明顯升高,血清NO含量、cGMP濃度顯著增高,cAMP濃度及cAMP/cGMP相對(duì)比值顯著降低,均有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異＜P＜0.05)。而電針治療可以使模型大鼠腦組織海馬區(qū)及紋狀體區(qū)低表達(dá)的NR2A蛋白升高,高表達(dá)的NR2B蛋白降低,血清中已升高的NO含量、cGMP濃度下降,降低的cAMP濃度升高,提高cAMP/cGMP的相對(duì)比值。
　　 結(jié)論:1.

6、神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分和形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果顯示電針組的腦損傷明顯輕于模型組,表明電針可以減輕腦缺血再灌注引起的損傷,改善局灶性腦缺血再灌注大鼠的神經(jīng)行為障礙。
　　 2.電針“百會(huì)”和“大椎”穴可以明顯升高缺血再灌注損傷腦組織中NR2A蛋白表達(dá),降低NR2B蛋白表達(dá)。
　　 3.電針可以降低血清中異常升高的NO含量,調(diào)節(jié)cAMP、cGMP的濃度,提高cAMP/cGMP相對(duì)比值。
　　 4.推測電針可以通過對(duì)NMDAR-NO-