主動靶向阿霉素脂質(zhì)體的制備及其體外評價.pdf

1、當(dāng)下，乳腺癌是最常發(fā)的一種婦科腫瘤，每年因乳腺癌病發(fā)而造成死亡的人數(shù)位居婦科腫瘤首位。手術(shù)治療是乳腺癌臨床治療的首選方案。放療和化療是乳腺癌治療的輔助手段，然而由于腫瘤放化療都會產(chǎn)生明顯的毒副作用，腫瘤化療具有較強的全身毒性，因此迫切需要探索新的治療手段。
　　整合素受體是在腫瘤細胞表面高度表達的一種受體，常見于乳腺癌，膠質(zhì)瘤以及肝癌和黑色素瘤等腫瘤細胞表面，而在其他正常細胞表面卻較少表達，因此整合素受體成為了腫瘤靶向治療的研究熱

2、點。有研究顯示 RGD是整合素受體的特異性配體，RGD肽對整合素受體具有高效選擇性。八聚精氨酸R8是由8個精氨酸分子呈鏈狀連接成的細胞穿膜肽，它能夠高效穿透與之接觸的細胞膜，進入細胞內(nèi)部，不具有選擇性。
　　本課題以臨床上常用的腫瘤化療藥物阿霉素為模型藥物，制備了R8-RGD修飾的阿霉素脂質(zhì)體。通過共價結(jié)合的方式，將 R8-RGD連接于脂質(zhì)體表面，制備了R8-RGD修飾的載阿霉素脂質(zhì)體。
　　本文的第一部分為MCF-7細胞的

3、培養(yǎng)及實驗分組。將實驗室保存的MCF-7細胞經(jīng)過復(fù)蘇，傳代培養(yǎng)，凍存等步驟進行培養(yǎng)并分組，將MCF-7細胞隨機分為PBS組、普通阿霉素脂質(zhì)體組、RGD修飾的阿霉素脂質(zhì)體組、R8修飾的阿霉素脂質(zhì)體組和RGD-R8修飾的阿霉素脂質(zhì)體組。
　　本文第二部分將制備不同的阿霉素脂質(zhì)體，對其理化性質(zhì)進行考察，并在細胞水平對其進行評價。首先是考察 RGD-R8修飾的阿霉素脂質(zhì)體表征。結(jié)果顯示，制備得到的 RGD-R8修飾的阿霉素脂質(zhì)體呈球形，粒

4、徑較為均一。由于阿霉素本身具有紅色熒光。我們以阿霉素為探針檢測了乳腺癌MCF-7細胞對于脂質(zhì)體的攝取能力，結(jié)果顯示，乳腺癌MCF-7細胞對RGD-R8修飾的阿霉素脂質(zhì)體的攝取效率顯著強于其他脂質(zhì)體組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（ P<0.01）。我們進一步考察了RGD-R8修飾的阿霉素脂質(zhì)體被MCF-7細胞攝取的機制。結(jié)果顯示：MCF-7細胞對RGD-R8修飾的阿霉素脂質(zhì)體的攝取是一個溫度、能量和電荷依賴的由網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的攝取過程。我們將載藥后的