15-oxoETE促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的機(jī)制研究.pdf

1、當(dāng)前心血管病仍是全球引起致殘致死的主要原因之一，在發(fā)展中國(guó)家仍有上升的趨勢(shì)，而動(dòng)脈粥樣硬化是心血管疾病的首要原因。目前被廣泛認(rèn)可的動(dòng)脈粥樣硬化危險(xiǎn)因素包括高膽固醇血癥、高血糖、脂質(zhì)紊亂、糖尿病、肥胖和吸煙等,而這些危險(xiǎn)因素都和其誘導(dǎo)的15-LOX-1（15-環(huán)氧合酶1）表達(dá)增加相關(guān)。在白介素-4（IL-4）的誘導(dǎo)下，15-LOX-1在單核細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá)，將花生四烯酸（AA）代謝成15-HETE（15羥二十碳花生四烯酸）,之后在15-PG

2、DH（15-羥基前列腺素脫氫酶）作用下代謝成15-oxoETE（15-羰二十碳花生四烯酸）。越來(lái)越多的研究表明15-LOX-1/15-HETE/15-oxoETE軸在動(dòng)脈粥樣硬化中扮演重要的角色。但是目前對(duì)15-oxoETE功能了解尚少且存在爭(zhēng)議。對(duì)臨床擬診冠心病的入院患者進(jìn)行選擇性冠狀動(dòng)脈造影。根據(jù)造影結(jié)果將患者分為正常組、冠心病組，并收集所有患者的臨床基本資料。收集全血標(biāo)本，采用HPLC-MS-MS方法測(cè)定血漿標(biāo)本中花生四烯酸各代謝

3、產(chǎn)物（5-HETE/oxo-ETE、12-HETE/oxo-ETE、15-HETE/oxo-ETE等）的含量。
　　結(jié)果顯示:冠心病組患者血漿中15-oxoETE明顯升高。細(xì)胞試驗(yàn)中，通過(guò)滲透性實(shí)驗(yàn)和單核細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)15-oxoETE可以破壞內(nèi)皮細(xì)胞屏障，增加內(nèi)皮細(xì)胞間的滲透性，促進(jìn)單核細(xì)胞粘附；通過(guò)細(xì)胞酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞表面粘附因子表達(dá)，結(jié)果顯示15-oxoETE會(huì)上調(diào)E-selectin。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分別給C57和A

4、poE-/-小鼠尾靜脈注射15-oxoETE，通過(guò)半在體粘附實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)15-oxoETE會(huì)增加單核細(xì)胞對(duì)血管的粘附；利用免疫組化實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)15-oxoETE同樣上調(diào)粘附因子E-selectin。另外，本研究還對(duì)15-oxoETE作用的信號(hào)通路進(jìn)行探索，通過(guò)PKC活性檢測(cè)和免疫印跡實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)15-oxoETE會(huì)使PKC激活，總PKC磷酸化增加，并上調(diào)PKCα的表達(dá)。本研究從臨床、動(dòng)物、細(xì)胞水平，探索15-oxoETE對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的影響及其機(jī)制