趨化因子Fractalkine調(diào)控IL-6-AKT-Stat3信號通路對人胰腺癌細胞株增殖侵襲影響及機制研究.pdf

1、目的:
　　初步探討趨化因子Fractalkine通過調(diào)控IL-6/AKT/Stat3信號通路對人胰腺癌細胞株增殖侵襲影響及機制。
　　方法:
　　實驗設(shè)置為對照組、FKN-siRNA組及FKN-siRNA陰性組；以腺病毒為載體構(gòu)建合成FKN-siRNA并對人胰腺癌細胞株P(guān)ANC-1和SW-1990進行轉(zhuǎn)染；應(yīng)用CCK-8實驗和Transwell小室侵襲試驗分別檢測細胞增殖活性及侵襲力，采用Western blot和R

2、T-PCR技術(shù)檢測人胰腺癌細胞株P(guān)ANC-1和SW-1990轉(zhuǎn)染FKN-siRNA后FKN、IL-6、AKT和Stat3蛋白及mRNA的表達。統(tǒng)計學(xué)處理采用單因素方差分析。
　　結(jié)果:
　?。?）趨化因子FKN在人胰腺癌細胞株P(guān)ANC-1及SW-1990中均有表達，并且FKN-siRNA成功對胰腺癌細胞株P(guān)ANC-1及SW-1990轉(zhuǎn)染。
　?。?）通過CCK-8法測定細胞增殖活性：轉(zhuǎn)染FKN-siRNA后在12h和2

3、4h時，PANC-1及SW-1990各組細胞吸光度值（OD）無明顯變化，在48h和72h時，F(xiàn)KN-siRNA組吸光度值明顯高于對照組和FKN-siRNA陰性組(P<0.05)。
　?。?）在細胞侵襲試驗中，人胰腺癌細胞株P(guān)ANC-1及SW-1990轉(zhuǎn)染FKN-siRNA后，F(xiàn)KN-siRNA組細胞侵襲力明顯強于對照組和FKN-siRNA陰性組(P<0.05)。
　　（4）Western blot和RT-PCR結(jié)果顯示：對人

4、胰腺癌細胞株P(guān)ANC-1及SW-1990轉(zhuǎn)染FKN-siRNA后，與對照組和FKN-siRNA陰性組相比較，F(xiàn)KN-siRNA組FKN蛋白與mRNA表達明顯減少（P<0.05）,與此同時，IL-6、AKT及Stat3的蛋白與mRNA表達量在FKN-siRNA組中明顯增多（P<0.05）。
　　結(jié)論:
　　1.應(yīng)用siRNA干擾沉默趨化因子FKN的功能后，人胰腺癌細胞株P(guān)ANC-1和SW-1990的增殖活性和侵襲力增強，表明趨