退熱止痛散解熱鎮(zhèn)痛活性部位軟膠囊的制劑開發(fā)研究.pdf

1、研究背景:退熱止痛散為紹老中醫(yī)臧堃堂教授的經(jīng)驗方,經(jīng)多年臨床驗證,其對于外感風(fēng)寒所致上呼吸道感染的發(fā)熱、頭痛等癥,具有顯著療效。但由于該方以散劑的形式應(yīng)用于臨床,病人服用劑量大,口感不佳,服用與攜帶極為不便,同時從衛(wèi)生學(xué)角度來看也不合規(guī)范。因此考慮以藥效為追蹤指標(biāo)采用現(xiàn)代的提取分離技術(shù),提取分離其有藥部位,以進行二次開。
　　 退熱止痛散主要由柴胡、羌活、桂枝藥材組成,在前期提取分離工作中運用了超臨界CO2萃取和分子蒸餾聯(lián)用技術(shù)

2、,以經(jīng)典的效為追蹤指標(biāo),采用正交試驗方法,篩選出其解熱鎮(zhèn)痛活性部位。此活性部位外觀性狀為棕黃色油狀物,初步判斷為多含揮發(fā)油脂溶性成分。經(jīng)GC/MS分析,該活性部位主要組分為桂皮醛和對乙酰氨基苯乙醚(非那西丁)。
　　 在篩選出活性部位的基礎(chǔ)上,課題組隨后對其相關(guān)藥效和安全性進行了系統(tǒng)評價,探討了其開發(fā)利用的可行性,并對其可能的作用機理進行了初步的研究。結(jié)果顯示,篩選得到的退熱止痛散活性部位,具有良好的解熱鎮(zhèn)痛藥效,且該活性部位安

3、全性好,毒性很低。以上研究表明,該活性部位具有良好的開發(fā)前景。
　　 本研究旨在退熱止痛散活性部位開發(fā)利用價值得已確認(rèn)的基礎(chǔ)上,對其進行制劑開發(fā)研究,內(nèi)容包括劑型選擇、制劑工藝篩選、制劑穩(wěn)定性研究及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究,以期開發(fā)出一種安全、有效、質(zhì)量可控及穩(wěn)定的中藥新藥?？紤]到揮發(fā)油具有揮發(fā)性、親脂性及對空氣、光、熱均較敏感等特點,因此選用軟膠囊劑,以提高制劑的穩(wěn)定性。
　　 研究目的:基于退熱止痛散活性部位前期研究工作的完成,

4、本課題的研究目的如下:
　　 1.對退熱止痛散活性部位進行質(zhì)控研究；
　　 2.對退熱止痛散活性部位進行軟膠囊制劑的開發(fā)；
　　 3.研究建立退熱止痛散活性部位軟膠囊制劑的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)；
　　 4.對退熱止痛散活性部位軟膠囊制劑的穩(wěn)定性進行考察。
　　 方法和結(jié)果
　　 1.退熱止痛散活性部位的質(zhì)控研究采用氣相-質(zhì)譜聯(lián)用方法對活性部位進行了化學(xué)成分分析。對活性部位中的桂枝和羌活藥材采用薄層色譜

5、法,結(jié)合高效液相色譜法的梯度洗脫指紋圖譜,對活性部位進行了定性鑒別。建立了高效液相色譜法測定活性部位中桂皮醛含量的定量方法,并對其進行了方法學(xué)考察,結(jié)果表明此方法精密度及重現(xiàn)性良好,回收率較高,桂皮醛含量為6.521％。
　　 2.退熱止痛散活性部位軟膠囊制劑研究實驗室制備軟膠囊膠皮和囊內(nèi)物,將膠皮浸入囊內(nèi)物模擬軟膠囊,在室溫和40℃環(huán)境下貯存,并在第0、3、10、20天取出測定膠皮的崩解度。對處方1組(囊內(nèi)物為花生油)、處方2

6、組(囊內(nèi)物為花生油和活性部位混合物)進行比較和方差分析。結(jié)果顯示,不同處方組之間的膠皮崩解時間有顯著性差異(P=0.000,F=27.771)；另處方3組(囊內(nèi)物為活性部位)出現(xiàn)未崩解現(xiàn)象,從直觀數(shù)據(jù)看出以膠皮浸入花生油中的崩解度為對照,膠皮浸入活性部位、活性部位與花生油混合物中均出現(xiàn)崩解時間延長現(xiàn)象。
　　 針對模擬軟膠囊實驗中出現(xiàn)的膠皮崩解遲緩現(xiàn)象,本實驗將活性部位制成包合物,使其包裹于環(huán)糊精中,然后制備軟膠囊。采用正交設(shè)計

7、法對退熱止痛散活性部位β環(huán)糊精包合工藝進行了優(yōu)選,比較了不同方法的包合率、收得率。
　　 包合工藝研究結(jié)果表明,飽和水溶液法,各因素對β—CD的包合效果均無顯著性影響(P=0.125,F=7.023:P=0.460,F=1.173:P=0.501,F=0.995)。最佳包合工藝條件為A2:B3:C1,即攪拌溫度為40℃,攪拌時間2h,活性部位與β—CD比例為1:8(g/g)。超聲法,超聲時間A因素的影響有顯著性差異(P=0.01

8、3,F=73.402),加水量B因素和活性部位比例C因素?zé)o顯著性影響(P=0.125,F=7.023:P=0.220,F=3.539)。選擇最佳的包合工藝條件為A1:B1:C2,即超聲時間2h,加水量為β—CD量的15倍,活性部位與β—CD比例為1:6(g/g)。研磨法,活性部位比例A因素和研磨時間B因素有顯著性差異(P=0.006,F=166.032:P=0.033,F=29.555),加水量C因素?zé)o顯著性影響(P=0.157,F=5

9、.387)。選擇最佳的包合工藝條件為A2:B2:C1,即研磨時間2h,加水量為β—CD量的4倍,活性部位與β環(huán)糊精(β—CD)比例為1:8(g/g)。
　　 選擇飽和水溶液法制備的包合物再次進行軟膠囊預(yù)實驗,實驗室制備軟膠囊膠皮和囊內(nèi)物,將膠皮浸入囊內(nèi)物模擬軟膠囊,在室溫和40℃環(huán)境下貯存,并在第0、3、10、20天取出測定膠皮的崩解度。對處方1組(囊內(nèi)物為花生油)、處方2組(囊內(nèi)物為花生油和包合物混合物)進行比較和方差分析,結(jié)

10、果顯示,囊內(nèi)物含活性部位的處方2組的膠皮崩解時間對比處方1組,無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.092,F=3.016)?？梢妼⒒钚圆课挥忙?環(huán)糊精包埋后,能有效改善膠皮的崩解問題,避免了囊內(nèi)物與膠皮之間交聯(lián)反應(yīng),從而增加了軟膠囊的穩(wěn)定性。
　　 在軟膠囊囊內(nèi)物的處方篩選研究中,對基質(zhì)種類和用量、濕潤劑大豆磷脂的用量進行了考察,得囊內(nèi)物最佳處方為:大豆油和活性部位包合物比例為1.5:1,加入1％的大豆磷脂.混合研勻,即得。
　　 3

11、.退熱止痛散活性部位軟膠囊制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究方面,對活性部位軟膠囊中桂枝和羌活藥材的相關(guān)成分采用薄層色譜法,結(jié)合高效液相色譜法的梯度洗脫指紋圖譜,對制劑進行了定性鑒別。采用高效液相色譜法測定活性部位桂皮醛的含量,制定了較為完善的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
　　 4.退熱止痛散活性部位軟膠囊制劑穩(wěn)定性考察對該制劑進行了穩(wěn)定性考察,通過常溫留樣觀察和加速實驗,根據(jù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)方案進行了觀察,結(jié)果表明,退熱止痛散活性部位軟膠囊制劑穩(wěn)定性良好

12、。
　　 結(jié)論:退熱止痛散活性部位為油性物質(zhì),且具有一定氣味和揮發(fā)性,軟膠囊同其它固體劑型相比具有有效成分含量高、生物利用度高、吸收迅速、穩(wěn)定性好、能有效掩蓋中藥揮發(fā)性成分的不良氣味等優(yōu)點,因此軟膠囊作為退熱止痛散活性部位制劑開發(fā)的劑型選擇合理可行。
　　 由于活性部位與軟膠囊膠皮接觸出現(xiàn)膠皮崩解遲緩現(xiàn)象,推測為活性部位中桂皮醛成分與膠皮發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)所致,因此,采用包合技術(shù)將活性部位包裹于β環(huán)糊精中再制備軟膠囊。

13、　　 包合工藝研究結(jié)果表明,研磨法優(yōu)選的最佳包合工藝較為理想,包合率、收得率較高；飽和水溶液法優(yōu)選的最佳包合工藝僅次于研磨法,且其工藝更適合于實際生產(chǎn),因此最終選擇飽和水溶液法作為退熱止痛散活性部位的β環(huán)糊精包合工藝。
　　 經(jīng)過包合物軟膠囊再次的預(yù)實驗,結(jié)果表明,退熱止痛散活性部位經(jīng)β環(huán)糊精包合后克服了膠皮崩解遲緩現(xiàn)象,明顯改善了軟膠囊的穩(wěn)定性。
　　 退熱止痛散活性部位軟膠囊制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及穩(wěn)定性研究結(jié)果表明,該制