楊扇舟蛾實驗種群對轉Bt基因楊樹抗性的研究.pdf

1、以楊扇舟蛾(Closteraanachoreta)幼蟲為實驗材料,應用F2代篩選法,在不同轉Bt基因楊樹葉片(CK、Pb17、Pb29)脅迫下,建立了抗轉Bt基因楊樹的楊扇舟蛾實驗種群。測定了不同Bt濃度脅迫篩選出的楊扇舟蛾實驗種群的死亡率和蟲內BtCrv1Ab/1Ac含量。因用SSR分子標記方法,對不同Bt表達量葉片飼養(yǎng)的楊扇舟蛾實驗種群進行了分析,從DNA水平分析了實驗種群的遺傳結構、遺傳多樣性和遺傳分化揭示了在轉Bt基因楊樹脅迫下

2、,楊扇舟蛾實驗種群的抗性機制。主要研究結果如下:
　　 1.F2代篩選法可以快速有效地監(jiān)測害蟲對Bt的抗性,經(jīng)室內篩選獲得對轉Bt基因楊樹有抗性的楊扇舟蛾(ClosteraAnachoreta)實驗種群即L-CK、L-Pb17、L-Pb29、D-CK、D-Pbl7、D-Pb29。
　　 2.在相同Bt濃度脅迫下,楊扇舟蛾實驗種群幼蟲1齡期死亡率最高,4齡時期死亡率最低,死亡率水平由高至低依次是1齡＞2齡＞3齡＞4齡,表明

3、楊扇舟蛾實驗種群死亡率隨著齡期增長而降低即隨著齡期增長昆蟲對Bt抗性增強;在不同Bt濃度脅迫下,楊扇舟蛾實驗種群死亡率,用Pb29轉基因楊樹葉飼養(yǎng)的楊扇舟蛾實驗種群死亡率最高,對照毛白楊飼養(yǎng)的楊扇舟蛾實驗種群死亡率最低,死亡率水平由高至低依次是Pb29＞Pb17＞CK,表明楊扇舟蛾實驗種群死亡率隨著Bt濃度的升高而升高。
　　 3.在不同Bt濃度脅迫下,用Pb29楊樹葉飼養(yǎng)的楊扇舟蛾實驗種群體內BtCry1Ab/1Ac含量高,而

4、用Pb17楊樹葉飼養(yǎng)的楊扇舟蛾實驗種群體內BtCry1Ab/1Ac含量較低,表明隨著Bt濃度的升高楊扇舟蛾實驗種群蟲體內BtCry1Ab/1Ac盼含量也升高;在相同Bt濃度脅迫下,楊扇舟蛾蟲體死亡蟲體和存活蟲體內BtCry1Ab/1Ac含量差異不顯著,L-17實驗種群BtCry1Ab/1Ac含量與D-17實驗種群BtCry1Ab/1Ac含量相當,L-29實驗種群BtCry1Ab/1Ac含量與D-29實驗種群BtCry1Ab/1Ac含量相

5、當,表明蟲體內BtCry1Ab/1Ac含量的多少與蟲體飼養(yǎng)時間長短無關。
　　 4.利用SSR分子標記技術,篩選出10對適合進行楊扇舟蛾遺傳分析的引物,在6個楊扇舟蛾實驗種群中共檢測到68條等位基因,位點平均等位基因數(shù)為6.8,平均多態(tài)位點百分率達96.67％。各實驗種群內平均有效等位基因數(shù)(Ne)為2.2399,平均期望雜合度(He)為0.5167,說明各實驗種群的遺傳多樣性較高。各實驗種群的遺傳多樣性由高至低依次為D-Pb2

6、9＞L-Pb17＞D-Pb17＞L-Pb29＞D-對照＞L-對照,表明轉基因楊樹對楊扇舟蛾實驗種群的遺傳多樣性具有明顯影響。
　　 5.實驗種群間的遺傳分化系數(shù)(FsT)平均值為0.28,說明各實驗種群內變異是楊扇舟蛾分化的主要來源,利用UPGMA方法聚類分析發(fā)現(xiàn),6個實驗種群被分為3類即L-對照和D-對照聚為一類,L-Pb29和L-Pbl7聚為一類,D-Pb29和D-Pb17聚為一類。研究結果表明轉Bt基因楊樹對楊扇舟蛾實驗種