基于炎癥因子及TGF-β1-Smad2信號通路探討加減三甲散對大鼠肝纖維化分子機制的影響.pdf

1、目的：
　　觀察加減三甲散治療肝纖維化的療效，從炎癥因子及TGF-β1/smad2信號通路方面探討其作用機制，以期部分揭示“主客交”理論的科學內涵。
　　方法：
　　SPF級Wistar雄性大鼠24只，隨機分成正常組、模型組、陽性對照組（復方鱉甲軟肝片）、加減三甲散組。常規(guī)飼養(yǎng)7d后給模型組、陽性對照組、加減三甲散組采用豬血清腹腔注射復制免疫性肝纖維化模型。造模后各組均灌胃給藥，1次/d，加減三甲散組劑量為8.125g

2、·kg-1，陽性對照組劑量為8.125g·kg-1,模型組及正常組予0.9％生理鹽水等體積灌胃。治療60d后麻醉處死大鼠取肝臟，HE和MASSON染色，切片光鏡觀察病理形態(tài)，ELLISA法檢測血清肝纖維化指標、IL-1、IL-6、TGF-α含量，RT-PCR法檢測肝臟組織TGF-β1/Smad2含量。
　　結果：
　　1.光鏡下正常組大鼠肝小葉結構完整，肝細胞未見變性及壞死，無明顯纖維結締組織增生。模型組大鼠肝細胞腫脹，出現(xiàn)

3、脂肪或氣球樣變，大量纖維組織出現(xiàn)在中央靜脈至匯管區(qū)，有假小葉形成。加減三甲散組及陽性對照組大鼠肝細胞輕度腫脹，排列紊亂，少量纖維組織增生。與正常組比較，模型組、陽性對照組、加減三甲散組大鼠肝組織炎癥活動度分級和纖維化程度分期及膠原纖維面積百分比均明顯升高（P＜0.05）；與模型組比較，陽性對照組、加減三甲散組肝組織炎癥活動度分級和纖維化程度分期及膠原纖維面積百分比均明顯降低（P＜0.05）；陽性對照組與加減三甲散組之間上述指標比較無明顯

4、差異（P＞0.05）。
　　2.與正常組比較，模型組大鼠血清HA、LN、PCⅢ、CⅣ水平均明顯升高（P＜0.05），加減三甲散組及陽性對照組大鼠血清PCⅢ、HA水平顯著升高（P＜0.05）；與模型組比較，加減三甲散組及陽性對照組大鼠血清HA、LN、PCⅢ水平明顯下降（P＜0.05）。
　　3.與正常組比較，模型組大鼠血清IL-1、IL-6、TGF-α值明顯升高（P＜0.05或P＜0.01），加減三甲散組和陽性對照組大鼠血清I

5、L-1、IL-6、TGF-α值無明顯差異（P＞0.05）；與模型組比較，加減三甲散組和陽性對照組大鼠血清IL-6值明顯降低（P＜0.05或P＜0.01）。
　　4.與正常組比較，模型組大鼠TGF-β1、Smad2表達均明顯升高（P＜0.05或P＜0.01），與模型組比較，加減三甲散組大鼠TGF-β1、Smad2表達均明顯降低（P＜0.05）。
　　結論：
　　1.加減三甲散可改善肝纖維化模型大鼠病理形態(tài)、部分血清肝纖維