COX-2ShRNA對大鼠肝纖維化TGF-β1-SMAD信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響.pdf

1、目的：研究靶向COX-2ShRNA對大鼠肝纖維化TGF-β1/SMAD信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響，為臨床治療肝纖維化提供新思路。
　　方法：SPF級雄性健康SD大鼠50只隨機(jī)分五組正常組（A組）、模型組（B組）、COX-2ShRNA組（C組）、空載體組（D組）、尼美舒利組（E）。B、C、D、E組根據(jù)文獻(xiàn)以高脂飲食+40％CCL4花生油灌胃(2ml/kg·5d)建立大鼠肝纖維化模型，造模第1周起，C組每只大鼠每天通過尾靜脈注射100ul C

2、OX-2ShRNA（滴度為1×1010 PFU/ml）重組腺病毒載體,進(jìn)行體內(nèi)轉(zhuǎn)染；D組注射等量不含COX-2 ShRNA基因的重組腺病毒空載體；E組予以尼美舒利（NS）灌胃2ml/kg·d；A組、B組給予等量生理鹽水；12周末最后一次給藥后禁食12h處死大鼠，計(jì)算肝濕重及肝指數(shù)，檢測血清生化指標(biāo)變化，HE、MASSON染色分析纖維病變程度。RT-PCR、免疫組化法觀察大鼠肝組織COX-2、TGF-β1與SMAD1-5的mRNA及蛋白的

3、表達(dá)，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果：⑴肝濕重與肝臟指數(shù)結(jié)果：與A組相比C組大鼠肝濕重與肝指數(shù)值明顯上升（P＜0.05）；與B、D組相比C組大鼠肝濕重及肝指數(shù)值明顯下降（P＜0.05）。⑵血清生化檢測結(jié)果：與A組相比C組大鼠血清生化指標(biāo)AST、ALT、TC、TG明顯水平上升（P＜0.05）；與B、D組相比C組大鼠血清生化指標(biāo)AST、ALT、TC、TG水平明顯下降（P＜0.05）。⑶HE、MASSO

4、N染色的結(jié)果：與A組相比C組大鼠肝肝纖維化病變程度明顯加重（P＜0.05）；與B、D組相比C組大鼠肝纖維化病變程度明顯減輕（P＜0.05）。⑷COX-2、TGF-β1及SMAD1-5的RT-PCR定量檢測及免疫組織化學(xué)法結(jié)果：與A組相比C組大鼠肝組織中COX-2、TGF-β1及SMAD1-5的mRNA表達(dá)明顯上升（P＜0.05）；與B、D組相比C組大鼠肝組織中COX-2、TGF-β1及SMAD1-5的mRNA表達(dá)明顯下降（P＜0.05）