擬南芥PPCl基因干涉表達調控油菜種子含油量研究.pdf

1、油菜(Brassica napus L.)是世界上第二大油料作物,菜籽油是繼大豆油、棕櫚油之后國際市場流通的第三大食用油。我國是世界油菜生產大國,油菜種植面積和總產量均居世界首位。提高種子含油量一直是油菜育種家追求的一個重要目標,然而采用常規(guī)方法提高含油量的研究進展比較緩慢,隨著植物基因工程技術的不斷發(fā)展,通過轉基因的方法提高油菜籽的含油量愈來愈受重視。
　　 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)被認為是控制蛋白質／油脂含量比例的

2、一個關鍵酶,通過抑制PEPC基因的表達可以調節(jié)油脂和蛋白質生物合成的共同底物PEP的流向,從而有望達到改變蛋白質與油脂含量比率、提高含油量的目的。油菜與擬南芥同屬十字花科蕓薹屬植物且基因組同源性很高,因此來自擬南芥的基因通?？梢栽谟筒酥兄苯邮褂谩１狙芯繌臄M南芥中克隆PPC1基因片段,構建成干涉表達載體后進行了油菜轉化,主要結果如下:
　　 1.根據擬南芥PPC1基因序列設計引物,以擬南芥基因組DNA為模板擴增出PPC1基因片段,

3、克隆至pMD18-T載體進行測序驗證后,以正向和反向連入質粒pFGC-5941中構建成由Napin啟動子驅動的RNAi表達載體。
　　 2.通過農桿菌介導法轉化油菜品系CY2,獲得86株T0轉化植株,移栽到大田后成活41株。經PCR檢測、Southern雜交和插入位點邊界序列分析確認獲得21株轉基因植株。
　　 3.部分T1代轉化株系的遺傳分析表明,目標基因大多為單位點和三位點插入,但也有一些株系屬于多位點整合。