九香蟲對(duì)紫芝發(fā)酵生產(chǎn)紫芝多糖和紫芝三萜的影響研究.pdf

1、本論文主要研究藥用真菌紫芝的深層發(fā)酵工藝，探討蟲類藥物九香蟲對(duì)紫芝發(fā)酵生產(chǎn)抗癌活性物質(zhì)紫芝多糖和三萜類物質(zhì)的影響，運(yùn)用正交設(shè)計(jì)對(duì)紫芝－九香蟲發(fā)酵生產(chǎn)胞內(nèi)多糖和胞外三萜類物質(zhì)進(jìn)行優(yōu)化，采用MTT法對(duì)所得產(chǎn)物的體外抗腫瘤活性進(jìn)行了研究。研究結(jié)果如下： 1、適宜紫芝液體發(fā)酵的糧食型培養(yǎng)基為：米糠6g/L，玉米粉20g/L，黃豆粉12g/L，蔗糖20g/L。此培養(yǎng)基培養(yǎng)的紫芝生物量可達(dá)15.12g/L。 2、在紫芝培養(yǎng)基中添加適

2、量的九香蟲，對(duì)紫芝的生長(zhǎng)影響不大，但能顯著提高紫芝的胞內(nèi)多糖和胞外三萜類物質(zhì)的產(chǎn)量。在紫芝培養(yǎng)基中添加5％的九香蟲，紫芝胞內(nèi)多糖的產(chǎn)量顯著提高，由原來(lái)的75.17mg/g菌體提高到105.01mg/g菌體；胞外多糖也有所提高，由原來(lái)的24.58mg/100mL提高到28.09mg/100mL。胞外三萜類物質(zhì)的含量由原來(lái)的132.6mg/L提高到157.1mg/L。但當(dāng)九香蟲的添加量增大到8％時(shí)，菌體生長(zhǎng)明顯受到抑制，多糖和三萜類物質(zhì)的產(chǎn)

3、量也明顯低于對(duì)照。 3、九香蟲提高紫芝活性物質(zhì)產(chǎn)量的有效成分的研究表明，九香蟲促進(jìn)紫芝胞內(nèi)多糖合成的有效成分主要是九香蟲水提取物；提高胞外三萜類物質(zhì)的產(chǎn)量的有效成分主要是九香蟲乙醇提取物；促進(jìn)胞外多糖分泌的有效成分主要是九香蟲乙醚提取物。 4、紫芝活性成分的發(fā)酵優(yōu)化，即九香蟲添加量、添加時(shí)間和總培養(yǎng)時(shí)間的優(yōu)化結(jié)果表明，以胞內(nèi)多糖產(chǎn)量為指標(biāo)時(shí)最佳添加量為5％，添加時(shí)間為發(fā)酵起始1天后加入，培養(yǎng)時(shí)間為6天，胞內(nèi)多糖產(chǎn)量可達(dá)1

4、09.28mg/g，比優(yōu)化前的105.01mg/g提高了4.27mg/g；以胞外三萜類物質(zhì)產(chǎn)量為指標(biāo)的添加量為5.5％，添加時(shí)間為發(fā)酵起始1天后加入，總培養(yǎng)時(shí)間為7.5天，胞外三萜類物質(zhì)產(chǎn)量為159.8mg/L，比優(yōu)化前的157.1mg/L提高了2.7mg/L。 5、紫芝三萜類物質(zhì)的體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)表明，在300μg/mL劑量下，紫芝-九香蟲發(fā)酵組對(duì)人腸癌細(xì)胞SW620的抑制率為46.01％，紫芝單獨(dú)發(fā)酵組的抑制率為45.89％；