核桃內(nèi)種皮多酚分析與抗氧化活性.pdf

1、核桃內(nèi)種皮(Walnut Kernel Pellicle)為包裹在核仁表面的一層薄膜，鮮核桃內(nèi)種皮呈黃色或淺黃色，干制后發(fā)生一定程度的褐變。在核桃加工產(chǎn)業(yè)內(nèi)種皮常被當(dāng)做廢棄物處理。如在核桃乳加工中，為了防止蛋白質(zhì)沉淀，首要步驟便是去除內(nèi)種皮。但許多研究已表明，核桃內(nèi)種皮中含有豐富的多酚類物質(zhì)。與熟知的茶多酚、葡萄籽多酚類似，內(nèi)種皮多酚也具有眾多的營養(yǎng)保健功能，包括清除人體自由基、抗衰老、抑制腫瘤增生等。因而重視核桃內(nèi)種皮多酚的開發(fā)利用對

2、提高核桃產(chǎn)業(yè)鏈的總體效益十分重要。
　　 本研究以中國八個核桃主栽品種（‘京861’，‘禮品2號’，‘薄豐’，‘中林1號’，‘扎343’，‘魯光’，‘遼寧1號’，‘香玲’）為試材，在測定比較內(nèi)種皮多酚含量的基礎(chǔ)上，對其抗氧化及抑酶活性進(jìn)行了綜合評價，并對內(nèi)種皮化學(xué)組成成分的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了初步鑒定，全文主要研究結(jié)果總結(jié)如下:
　　 (1)利用液氮急凍法分離內(nèi)種皮，較之水泡法與堿煮法，具有操作時間較短、去皮效果好、核仁品質(zhì)穩(wěn)定、

3、環(huán)境污染小等優(yōu)點(diǎn)。經(jīng)三種去皮方法處理后，內(nèi)種皮中酚類物質(zhì)殘有量分別為28％、17％、0％，表明經(jīng)液氮急凍法分離種皮更適宜進(jìn)行后續(xù)加工。
　　 (2)利用超聲輔助溶劑萃取法對內(nèi)種皮中的酚類物質(zhì)進(jìn)行提取，經(jīng)響應(yīng)面法優(yōu)化后確定最佳提取工藝為提取溫度53℃，提取時間55min，提取液固比58mL/g，此條件下提取得率高達(dá)30.789％。
　　 (3)根據(jù)比色原理，分別測定八個主栽核桃品種內(nèi)種皮中總酚、總黃酮、縮合單寧含量。三種含

4、量變化范圍分別為205.37±5.13～307.31±5.87mg沒食子酸/g內(nèi)種皮，79.11±1.80～126.75±2.87mg蘆丁/g內(nèi)種皮以及11.11±0.21～34.54±0.20mg兒茶素/g內(nèi)種皮。八個品種中，‘京861’三種含量均為最高，表明‘京861’具有更長的貨架壽命，且其內(nèi)種皮的再利用價值較高。而栽植面積較廣的‘香玲’三種含量較低，表明其澀味輕，具有較好的風(fēng)味。
　　 (4)利用DPPH、ABTS、鐵還

5、原法、β-胡蘿卜/亞油酸漂白法對內(nèi)種皮多酚提取物的抗氧化能力進(jìn)行測定。前三種體系測定結(jié)果顯示，內(nèi)種皮多酚提取物的抗氧化性較強(qiáng)，在較低濃度下便可具有較高的自由基清除能力或還原能力，且抗氧化性與總酚含量之間呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.9092，0.9184，0.8973，表明總酚含量高的內(nèi)種皮適宜進(jìn)行抗氧化產(chǎn)品的開發(fā)利用。而利用β-胡蘿卜/亞油酸漂白法測定的抗氧化性與酚類物質(zhì)含量無相關(guān)性，需進(jìn)一步從反應(yīng)機(jī)理等角度考證此方法的適用性。

6、　　 (5)利用體外抑酶實驗，對內(nèi)種皮多酚提取物的α-淀粉酶抑制活性進(jìn)行測定。結(jié)果顯示八個品種中，內(nèi)種皮多酚提取物對α-淀粉酶的半數(shù)抑制濃度(IC50)大小范圍為100～250μg/mL，且該活性僅與縮合單寧含量密切相關(guān)，相關(guān)系數(shù)達(dá)0.8129。表明單寧含量高的內(nèi)種皮適宜進(jìn)行糖尿病治療藥物的開發(fā)利用。
　　 (6)通過在線甲基化Py-GC-MS分析，共在內(nèi)種皮中鑒定出26種化合物，根據(jù)結(jié)構(gòu)特征歸屬為三類，分別是小分子醇/酸類(

7、占總峰面積0.548％)，酚酸類(4.46％)，長鏈脂肪酸類(7.635％)。其中，酚酸類化合物的保留時間集中在14～22min，鑒定出的結(jié)構(gòu)包括焦性沒食子酸(0.182％)、1，2，4-苯三酚(0.053％)、對羧基苯甲酸(0.076％)、2，4，6-三羥基苯甲酸(0.028％)、3，4，5-三羥基甲苯(0.035％)、1，2，3，4-苯四酚(0.026％)、鄰苯二甲酸(0.023％)、3，4-二羥基苯乙酸(0.054％)、對羥基肉桂