羅格列酮對糖尿病大鼠大血管中磷酸化IKK和IκBα表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討羅格列酮對糖尿病大鼠大血管組織中磷酸化核因子-κB(NF-κB)抑制蛋白激酶(IKK)及其下游作用物NT-κB抑制蛋白(IκBα)表達(dá)的影響，為其在糖尿病大血管病變的臨床治療提供理論依據(jù)。 方法：將48只近交、清潔級雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為正常對照組(A組n=16)、糖尿病組(B組n=16)和羅格列酮治療組(C組n=16)，禁食12小時后，B組和C組一次性腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)50mg/kg(用0.1mol/

2、L的枸櫞酸緩沖液新鮮配制，PH 4.5)，A組僅注射等體積枸櫞酸緩沖液。72小時后至少連續(xù)三天剪尾檢測血糖，以連續(xù)三次血糖≥16.7mol/L為造模成功。各組于成模3天后給藥，C組給予5mg·kg-1·d-1羅格列酮生理鹽水混懸液灌胃，A組和B組給予等體積生理鹽水灌胃。實(shí)驗(yàn)8和12周后每組各取8只，稱體重、測血糖。同時測定血脂水平和C肽。取頸動脈固定后行光鏡、電鏡觀察血管的病理組織學(xué)改變，并測定病理切片上頸動脈內(nèi)中膜厚度(IMT)，采用

3、免疫組化技術(shù)檢測磷酸化IKK和磷酸化IκBα表達(dá)。 結(jié)果： 1、注射STZ72小時后，糖尿病組和羅格列酮干預(yù)組大鼠血糖顯著增高，與對照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。糖尿病組和羅格列酮干預(yù)組大鼠在注射STZ后空腹血清C肽顯著低于對照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。與對照組比較糖尿病組大鼠體重減輕，與糖尿病組比較羅格列酮組大鼠體重增加，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)。 2、8、12周時，與對照組比較，糖尿病組和

4、羅格列酮干預(yù)組大鼠頸動脈內(nèi)中膜厚度(IMT)增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)，而羅格列酮干預(yù)組大鼠頸動脈內(nèi)中膜厚度(IMT)顯著低于糖尿病組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)；糖尿病組大鼠頸動脈內(nèi)中膜厚度(IMT)隨病程延長增加；羅格列酮干預(yù)組大鼠頸動脈內(nèi)中膜厚度(IMT)隨療程延長減少。糖尿病組中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)的增高，高密度脂蛋白(HDL-C)的下降較對照組有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0

5、.05)。 3、光鏡可見，糖尿病組大鼠頸動脈內(nèi)皮細(xì)胞排列逐漸紊亂，中膜平滑肌細(xì)胞明顯增生，導(dǎo)致頸動脈管壁顯著增厚，管腔狹窄，羅格列酮干預(yù)組上述病理改變減輕。 4、電鏡可見，與對照組比較，糖尿病組和羅格列酮干預(yù)組大鼠內(nèi)皮細(xì)胞變性壞死，彈力膜斷裂。與糖尿病組相比，羅格列酮干預(yù)組的上述病理改變顯著減輕。 5、免疫組化半定量分析顯示，對照組大鼠頸動脈組織中有少量磷酸化IKK、磷酸化IκBα表達(dá)。8、12周時，與對照組比較

6、，糖尿病組和羅格列酮干預(yù)組大鼠頸動脈組織中磷酸化IKK及磷酸化IκBα表達(dá)增加，但羅格列酮干預(yù)組中磷酸化IKK及磷酸化IκBα表達(dá)顯著低于糖尿病組，并隨著療程的延長有下降趨勢。直線相關(guān)分析顯示：糖尿病組頸動脈內(nèi)磷酸化IKK及磷酸化I κ B α的表達(dá)與頸動脈內(nèi)中膜厚度(IMT)呈顯著正相關(guān)，且糖尿病組頸動脈內(nèi)磷酸化IKK與磷酸化I κ B α的表達(dá)呈顯著正相關(guān)。 結(jié)論：1.成功的建立了糖尿病大鼠早期動脈粥樣硬化模型，其內(nèi)皮細(xì)胞排

7、列紊亂，中膜平滑肌細(xì)胞明顯增生，頸動脈管壁顯著增厚，管腔狹窄；IMT升高。2.糖尿病組頸動脈內(nèi)磷酸化IKK及與I κ B α的表達(dá)水平呈顯著正相關(guān)，磷酸化IKK及I κ B α在頸動脈中的表達(dá)水平隨糖尿病大血管病變的病程發(fā)展逐漸升高，提示磷酸化IKK及I κ B α是糖尿病大血管病變發(fā)生的危險因素。3.羅格列酮可能通過抑制IKK活化，進(jìn)而抑制I κ B α降解，降低NF-κ B活化水平，減少內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，抑制細(xì)胞外基質(zhì)增生，從而減輕動脈