松蘿酸鈉在大鼠皮膚傷口愈合過程中對成纖維細胞的影響.pdf

1、實驗目的:
　　從地衣類植物長松蘿中可提取出松蘿酸，有研究表明，松蘿酸有抗菌、毒性、抗蟲、抗腫瘤等生物活性，將松蘿酸合成鈉鹽，即松蘿酸鈉后，可使其毒性大幅降低。成纖維細胞作為創(chuàng)傷修復的工程師，在這一生理活動中起關鍵性作用，本次研究，通過對傷口及周圍組織用藥后，通過病理切片觀察傷口及附近組織內成纖維細胞、膠原蛋白含量變化，并應用松蘿酸鈉于體外培養(yǎng)的成纖維細胞，從而探究松蘿酸鈉在傷口愈合這一過程中對成纖維細胞、愈合相關生長因子等的影響

2、。
　　實驗方法:
　　試驗采用wistar大鼠，體重約為200-220g，將12只雄性大鼠隨機分成四組，分別為生理鹽水組（空白組）、慶大霉素組（陽性對照）、溶劑對照組（陰性對照）、松蘿酸鈉組（實驗組）。傷口造模后，每日傷口處涂抹藥物，并測量傷口直徑，計算愈合率，傷口完全愈合后對比各組愈合率。第二組試驗中使用60只大鼠，隨機分為生理鹽水組（空白組）、慶大霉素組（陽性對照）、溶劑對照組（陰性對照）、松蘿酸鈉組（實驗組）。4組，

3、每組15只，傷口造模和用藥與測傷口愈合率時相同，并在造模完成后第1d、3d、7d、14d、21d進行取樣，每組取3只，麻醉致死后取傷口及周圍約3cm組織，進行病理切片觀察并做免疫組化檢測。體外實驗以L929細胞（小鼠成纖維細胞）為實驗對象，檢測松蘿酸鈉對其增殖、遷移速率、分泌生長因子以及合成膠原的影響。
　　實驗結果顯示:
　　傷口愈合率的比較中，松蘿酸鈉與慶大霉素相似，明顯高于空白組與溶劑對照組。病理切片中可觀察松蘿酸鈉組

4、與慶大霉素組成纖維細胞含量高于其他兩組，膠原纖維更豐富，排列更緊密。免疫組化的結果表明，轉化生長因子-β1(TGF-β1)在1d到3d，各組都表現(xiàn)為大量分泌，慶大霉素組與松蘿酸鈉組對比空白組與溶媒組極顯著，7d時出現(xiàn)TGF-β1水平下降，慶大霉素組與松蘿酸鈉組水平下降趨勢更明顯。體外L929細胞培養(yǎng)實驗中，松蘿酸鈉對其L929的增殖作用不明顯，單加速了細胞的遷移，而且促進其分泌轉化生長因子-β1(TGF-β1)與膠原的合成。