rhbFGF和rhEGF對(duì)成纖維細(xì)胞的促增殖作用.pdf

1、目的：掌握人皮膚成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)，了解該細(xì)胞的生長(zhǎng)特性；研究重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(rhbFGF)和重組人表皮生長(zhǎng)因子(rhEGF)在不同濃度下對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞增殖的影響，以及這兩種因子對(duì)成纖維細(xì)胞有無(wú)異常分化，從而為臨床準(zhǔn)確定量應(yīng)用這兩種因子修復(fù)創(chuàng)面、加速創(chuàng)面愈合提供理論依據(jù)。 方法：體外培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞，用不同濃度的rhbFGF和rhEGF干預(yù)細(xì)胞，四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT)檢測(cè)細(xì)胞的活性，選擇最適濃度生

2、長(zhǎng)因子干預(yù)的細(xì)胞，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞的DNA倍體情況。 結(jié)果：①成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程的觀察：成纖維細(xì)胞傳代24h后基本貼壁，少數(shù)未貼壁的細(xì)胞在換液過(guò)程中被清除，約4天左右長(zhǎng)滿瓶底的80％，繼續(xù)傳代。該細(xì)胞多呈長(zhǎng)梭形生長(zhǎng)，在瓶?jī)?nèi)分布均勻，量多時(shí)呈柵欄狀排列。②不同濃度的rhbFGF對(duì)成纖維細(xì)胞增殖的影響：分別用不同濃度序列因子干預(yù)48小時(shí)后測(cè)定MTT值，結(jié)果顯示濃度在50ug/L時(shí)MTT值最大。③不同濃度的rhEGF對(duì)成纖維細(xì)胞增

3、殖的影響：分別用不同濃度序列因子干預(yù)48小時(shí)后測(cè)定MTT值，結(jié)果顯示濃度在80ug/L時(shí)MTT值最大。④培養(yǎng)24h時(shí)分別用流式細(xì)胞儀對(duì)rhbFGF和rhEGF最適濃度下細(xì)胞倍體的含量進(jìn)行測(cè)定。 結(jié)論：rhbFGF濃度在20.100ug/L之間對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞有明顯的促增殖作用，其中以50ug/L作用最明顯，為最適濃度。rhEGF濃度在30-100ug/L之間對(duì)成纖維細(xì)胞均有較明顯的促增殖作用，以80ug/L作用最顯著。這兩種生