流式細胞術下觀察地塞米松和環(huán)孢素對嗜堿粒細胞活化的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、背景:
   變態(tài)反應性疾病在人群中十分常見,治療仍然棘手。嗜堿粒細胞作為Ⅰ型變態(tài)反應的效應細胞,正逐漸引起人們重視,可能成為治療變態(tài)反應性疾病的重要靶點?,F(xiàn)有的方法通過檢測細胞介質和細胞因子釋放量來觀察嗜堿粒細胞活化,操作較困難而且敏感性和特異性也不理想。流式細胞術的發(fā)展使體外檢測嗜堿粒細胞的活化成為可能,有著方便、快捷、敏感性和特異性均較好的特點。
   目的:
   在體外建立IgE介導的嗜堿粒細胞活化模型

2、,通過加入不同藥物濃度的地塞米松、環(huán)孢素和氯苯那敏,觀察嗜堿粒細胞表面活化標記表達的變化,探討藥物對體外嗜堿粒細胞活化的作用。
   方法:
   抽取健康志愿者靜脈血,分為不同濃度的地塞米松、環(huán)孢素和氯苯那敏處理組,加入不同濃度的藥物在37℃預孵育1小時,陰性和陽性對照組均加入等量的PBS并孵育1小時。隨后陽性對照組和藥物處理組分別加入抗IgE抗體以活化嗜堿粒細胞,陰性對照組加入等量PBS。各組細胞采用CD63FITC

3、/CD123PE/HLA-DRPerCP染色標記,通過流式細胞術檢測外周血嗜堿粒細胞表面CD63的表達。
   結果:
   1.陰性對照組嗜堿粒細胞表面CD63陽性百分比為0.70±0.86%,陽性對照組嗜堿粒細胞表面CD63陽性百分比為50.58+9.04%,兩者差異有顯著性(P<0.01)。
   2.不同濃度的地塞米松處理組中,嗜堿粒細胞表面CD63陽性表達受到明顯抑制,差異有顯著性(P<0.01)。藥物

4、濃度越高,CD63陽性細胞越少。
   3.不同濃度的環(huán)孢素處理組中,嗜堿粒細胞表面CD63陽性表達均大幅降低,差異有顯著性(P<0.01)。不同濃度的環(huán)孢素處理組之間,CD63表達沒有顯著性差異(P>0.05)。
   4.濃度為10-2M氯苯那敏處理組CD63陽性的細胞百分比降低,與陽性對照相比差異有顯著性(P<0.05),濃度為10-3M和10-4M的氯苯那敏處理組CD63陽性細胞和陽性對照組之間無顯著性差異(P>

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