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文檔簡介
1、本實驗以核盤菌(Sclerotinia sclerotiorum(Lib.)de Bary)為實驗菌株,在含有不同碳源和氮源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)核盤菌后,確定產(chǎn)EPSP合成酶的最適碳源和最適氮源分別為蔗糖和硝酸銨.對AROM蛋白復合體中的EPSP合成酶的酶學性質研究的實驗結果表明,該酶酶促反應的最適溫度為30℃,最適pH值為7.2;60℃以下相對酶活均保持在60﹪以上;在pH6.7~7.5范圍內(nèi),它的活性較為穩(wěn)定;單價的金屬離子K+和化合物E
2、DTA對它有一定的激活作用,而脲對它的抑制作用最明顯,其次是Mg<'2+>和Mn<'2+>;約12.346μmol/L的草甘膦就可以抑制50﹪的酶活性.動力學分析表明這種EPSP合成酶的兩種底物在低濃度時符合米氏動力學,而在高濃度情況下對酶活性有一定的抑制作用;作圖法初步鑒定該EPSP合成酶的反應機制為序列機制;Hill作圖表明它是一種具有負協(xié)同效應的別構酶,因此求得的動力學常數(shù)均為表觀常數(shù),其中K<,m>(PEP)為140.28μmo
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