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1、目的:研究中藥溫化蠲痹方對(duì)CIA大鼠外周血TNF-α和IL-1β水平及滑膜細(xì)胞凋亡、增殖的影響,以探討溫化蠲痹方治療CIA作用機(jī)理。
方法:選用雄性Wistar大鼠,隨機(jī)分為正常對(duì)照組(n=10)和造模組。造模組采用頸、背部5個(gè)部位皮內(nèi)多點(diǎn)注射BCⅡ乳劑的方法進(jìn)行免疫,建立CIA模型。造模成功后隨機(jī)分為模型對(duì)照組(n=10)、溫化蠲痹方組(中藥組,n=10)和MTX組(n=10)。采用容積法(排水體積)和計(jì)分法分別評(píng)價(jià)足趾腫脹
2、度和關(guān)節(jié)炎癥程度。分別灌胃給藥:中藥組給予溫化蠲痹方,劑量為22.9g/kg·d,每天1次;正常組和模型組給予等量生理鹽水,每天1次;MTX組給予MTX混懸液,劑量為0.78mg/kg·w,每周1次。治療30天后處死,取各組膝關(guān)節(jié)滑膜及血清。運(yùn)用HE染色,光鏡下按大鼠滑膜病理5級(jí)評(píng)分法評(píng)定滑膜炎細(xì)胞浸潤(rùn)和滑膜細(xì)胞增生的程度、采用ELISA法檢測(cè)外周血中TNF-α和IL-1β水平、運(yùn)用TUNEL法檢測(cè)滑膜細(xì)胞凋亡。
結(jié)果:
3、> ?、僮阒耗[脹度測(cè)量和AI評(píng)分結(jié)果顯示:與正常組比較,模型組大鼠足趾腫脹明顯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);與模型組比較,中藥組和MTX組大鼠足趾腫脹明顯減輕,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);而中藥組和MTX組之間比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);與治療前比較,中藥組和MTX組大鼠足趾腫脹明顯減輕,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
?、诨E染色病理形態(tài)學(xué)評(píng)價(jià)顯示:與正常組比較,模型組大鼠關(guān)節(jié)滑膜炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和
4、增生程度明顯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);與模型組比較,中藥組和MTX組大鼠關(guān)節(jié)滑膜炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和增生程度顯著減輕,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);而中藥組和MTX組之間比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
③外周血TNF-α和IL-1β檢測(cè)結(jié)果顯示:與正常組比較,模型組大鼠外周血TNF-α和IL-1β水平顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);與模型組比較,中藥組和MTX組外周血TNF-α和IL-1β水平顯著
5、性降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);并且中藥組大鼠外周血TNF-α濃度接近正常水平;中藥組和MTX組之間比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
?、躎UNEL法檢測(cè)滑膜細(xì)胞凋亡結(jié)果顯示:與正常組比較,模型組大鼠滑膜細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);與模型組比較,中藥組和MTX組滑膜細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯升高,接近正常對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);中藥組和MTX組之間比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P
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