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文檔簡介
1、目的: 采用高脂肪飲食制備SD大鼠非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型,并予羅格列酮干預(yù),檢測不同療程治療低劑量組、高劑量組、對照組與模型組中血脂、肝X受體a(Liver X receptor-a,LXR-a)及固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1c(steml regulatory element-binding protein一1c,SREBP-1c)表達(dá)差異及這些指標(biāo)與
2、肝組織病理變化的相關(guān)性,以闡明:LXR-a、SREBP-1c在NAFtD發(fā)病和疾病進(jìn)展中的作用,并研究PPAR-γ配體羅格列酮防治非酒精性脂肪肝發(fā)病和進(jìn)展的療效及作用機(jī)制。 方法: 42只雄性健康SD大鼠正常喂養(yǎng)1周后,隨機(jī)分為正常對照組、NAFLD組、羅格列酮早期干預(yù)組(即高脂喂養(yǎng)4周后予羅格列酮干預(yù),又隨機(jī)分為低劑量治療組、高劑量治療組),羅格列酮晚期干預(yù)組(即高脂喂養(yǎng)8周后予羅格列酮干預(yù),又隨機(jī)分為低劑量治療組、高
3、劑量治療組);12周末,處死所有大鼠。取血和肝組織標(biāo)本。用全自動(dòng)生化分析儀檢測血清及肝勻漿液中甘油三酯(trilyceride,TG)、膽固醇(total cholesterol,TC)及血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate aminotransferase,AST)的水平。肝組織標(biāo)本石蠟切片,行蘇木素-伊紅(Hemotoxylin eosin,HE)染色,光鏡下評(píng)
4、估肝組織脂肪變性程度。分別以反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(Reverse transcript-polymerase chain reaction,RT-PCR)及免疫組織化學(xué)法檢測肝組織LXR-a、SREBP-1c的mRNA與蛋白的表達(dá)。 結(jié)果: 1.與對照組比較,模型組大鼠體重、肝指數(shù)均升高(P<0.05),羅格列酮治療后大鼠體重高于模型組,但肝指數(shù)顯著低于模型組(P<0.05),且早期干預(yù)優(yōu)于晚期干預(yù),并呈劑量依賴性。
5、 2.與對照組比較,模型組存在脂質(zhì)代謝紊亂(P<0.05),羅格列酮治療后脂代謝紊亂明顯改善(P<0.05),且早期干預(yù)優(yōu)于晚期干預(yù),并呈劑量依賴性。 3.與對照組比較,模型組有程度不同的脂肪變形,以中、重度為主(P<0.05),羅格列酮治療后脂肪變以輕度為主,較模型組明顯改善(P<0.05),且早期干預(yù)優(yōu)于晚期干預(yù),并呈劑量依賴性。 4.與對照組比較,模型組LXR-a、SREBP-1c mRNA及蛋白水平均顯著增高p
6、<0.05),羅格列酮治療后LXR-a、SREBP-1c表達(dá)水平均明顯下降(P<0.05),且早期干預(yù)優(yōu)于晚期干預(yù),并呈劑量依賴性。 結(jié)論: 1.本研究成功建立高脂飲食誘導(dǎo)的非酒精性脂肪肝動(dòng)物模型。 2.在高脂飲食誘導(dǎo)的NAFLD模型中肝臟的LXR-a、SREBP-1c表達(dá)升高,LXR-a可能通過上調(diào)SREBP-1c的表達(dá)加重肝臟脂肪變性而參與NAFID發(fā)病。 3.羅格列酮可減輕肝臟脂肪變性,對NAFID
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