硫酸類肝素-3-0-磺基轉移酶B1(HS3ST3B1)對乙型肝炎病毒(HBV)復制的下調作用.pdf

1、目的：在HBV的生命周期中，HBV的復制是受到宿主和自身各種因素控制的。本課題旨在研究宿主因子HS3ST381對HBV復制的影響，并探討可能的作用機制。
　　 方法：將HS3ST381與HBV表達質粒pCH9-HBV共轉染HepG2細胞，利用Southern blot和實時聚合酶鏈式反應(Real-time PCR)技術檢測過表達HS3ST381后HBV復制水平和總RNA水平的變化；同時，干擾過表達HS3ST381后，檢測HBV

2、復制水平和總RNA水平的變化；干擾內源性HS3ST3BI后，檢測HBV復制水平的變化。在HBV穩(wěn)定細胞株HepG2. H7中轉染不同量HS3ST381，檢測HBV復制水平的變化；利用雙熒光素酶報告系統(tǒng)檢測過表達HS3ST381后HBV啟動子活性的改變，及干擾過表達的HS3ST381后HBV啟動子活性的改變。
　　 結果：Southern blot顯示：在HBV瞬時表達模型中，過表達HS3ST381后，HBV DNA水平有明顯下降

3、。RNAi干擾過表達HS3ST381后，HBV DNA水平則有所恢復；干擾內源性HS3ST381，HBV DNA水平有一定程度上升；在HBV穩(wěn)定表達模型H7中，不僅進一步證實HS3ST381對HBV復制的下調作用，而且HBV DNA水平隨著HS3ST381轉染量增加而下降，呈現(xiàn)出HS3ST381的濃度依賴性。Real-time PCR顯示：過表達HS3ST381后，HBV總RNA水平有明顯下調，而干擾過表達HS3ST381后，HBV總R