重組人腦利鈉肽表達(dá)及生物學(xué)活性測(cè)定.pdf

1、腦利鈉肽（Brain natriuretic peptide，BNP，又稱B型鈉尿肽）是于1988年由日本學(xué)者Sudoh等首次從豬腦中分離而得來的，但實(shí)際上腦利鈉肽的主要來源是心室、尤其是左心室為主。腦利鈉肽與A型利鈉肽(Atrial natriuretic peptide，ANP)、C型利鈉肽(C-type natriuretic peptide，CNP)同屬于利鈉肽（Natriuretic peptide，NP）家族。利鈉肽家族是維

2、持血壓穩(wěn)定及水、鹽代謝平衡的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，心力衰竭(Heartfailure，HF)時(shí)由于容量超載和心室壁張力增加，利鈉肽家族就被高度激活。利鈉肽家族具有調(diào)節(jié)血壓，利尿，擴(kuò)張心外膜以及冠狀動(dòng)脈，抑制血管平滑肌增殖，抑制血管組織增生等作用。所以利鈉肽家族在檢測(cè)和治療心血管系統(tǒng)疾病方面有著巨大的前景。
　　腦利鈉肽是一種多肽類神經(jīng)激素，由32個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成，其中氨基端第7個(gè)和第23個(gè)殘基由二硫鍵形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，形成腦利鈉肽的功能域。與

3、其天然受體結(jié)合后，可激活其胞內(nèi)區(qū)的鳥苷酸環(huán)化酶活性，催化三磷酸鳥苷(Guanosmetriphosphate，GTP)轉(zhuǎn)化為環(huán)磷酸鳥苷(Cyclic guanosine monophosphate，cGMP)。所以通過檢測(cè)cGMP含量可以測(cè)定重組人腦利鈉肽的生物學(xué)活性。
　　通過分子克隆的方法，對(duì)人腦利鈉肽的基因序列進(jìn)行優(yōu)化合成，構(gòu)建表達(dá)載體，對(duì)其進(jìn)行測(cè)序鑒定，并轉(zhuǎn)化到大腸埃希菌BL21原核表達(dá)系統(tǒng)中，篩選陽性單克隆菌落，得到重組