通過全基因組掃描研究定位小鼠性發(fā)育相關基因.pdf

1、性發(fā)育是指個體性成熟并獲得生殖能力的過程,受到遺傳、環(huán)境等多種因素的影響。為了尋找與性發(fā)育啟動相關的基因,本研究選擇性發(fā)育啟動時間有明顯差異的近交品系小鼠C3H/HeJ(C3)和C57BL/6J(B6)進行正交和反交,建立了兩個F2代家系。鑒定小鼠性發(fā)育啟動的方法在雄鼠中采用觀察其陰莖-包皮分離,在雌鼠中采用觀察其陰門開啟。實驗分析了親本、正反交子一代及其子二代的性發(fā)育啟動天數(shù)的差異。結果顯示在親本中性發(fā)育啟動差異極顯著(P=3.7×1

2、0-13),在子一代中正反交性發(fā)育啟動差異顯著(P=5.4×10-3),子二代正反交沒有顯著差異(P=0.0941)。并計算出小鼠性發(fā)育啟動的遺傳率在正反交家系中分別為63.97％和68.48%。說明本研究成功地建立了兩個家系。從534只F2代雌性小鼠中只挑選一窩同胞數(shù)在6~10只范圍內的小鼠個體作為的實驗樣本,并在其中挑選出具有極端陰門開啟年齡的雌鼠259只(其中C386F2小鼠161只、B6C3F2小鼠98只)進行全基因組遺傳位標掃

3、描。每條染色體上選取4~7個STR或SNP位標作為遺傳標記,平均間距15~20CM。本實驗室以往的研究工作已對6號,13號,X染色體進行了先期掃描。并在正交F2代小鼠中X染色體上發(fā)現(xiàn)DXMit166與性發(fā)育啟動顯著相關(LOD=3.856,P＜0.05)。在反交F2代小鼠中沒有陽性結果。本研究在前期工作的基礎上對其余17條染色體進行基因組掃描以研究在其他染色體上是否還存在與性發(fā)育相關的區(qū)段。實驗中分別采用連鎖分析和連鎖不平衡分析的方法對

4、分型數(shù)據進行了分析和驗證。在連鎖分析中發(fā)現(xiàn):正交F2代小鼠中,5號和12號染色體上各有一個區(qū)段提示與性狀相關(D5Mit367,LOD=2.423;D12Mit144,LOD=2.196),反交F2代小鼠中沒有陽性結果。并應用連鎖不平衡分析驗證了這兩個位點與小鼠性發(fā)育啟動天數(shù)顯著相關(P＜0.05)。通過本實驗,使我們對小鼠全基因組中與性發(fā)育相關的位點有了更全面的了解,同時為下一步縮小相關區(qū)段,進行精細定位奠定了基礎。此項研究最終也將為